使用奧林巴斯進(jìn)口顯微鏡 CX43 進(jìn)行組織切片觀察,一般可按照以下步驟進(jìn)行:
準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備好已經(jīng)處理好的組織切片,,確保切片經(jīng)過固定,、脫水、透明,、浸蠟,、包埋、切片和染色等一系列常規(guī)組織學(xué)處理步驟,,常見的染色方法如 HE 染色,,以便于觀察組織結(jié)構(gòu)。
清潔顯微鏡的載物臺,、物鏡,、目鏡等部件,,確保無灰塵、污漬等影響觀察的因素,。接通顯微鏡電源,,打開光源,調(diào)節(jié)亮度旋鈕,,將光源亮度調(diào)至適中,,為后續(xù)觀察做好準(zhǔn)備。
放置切片
將組織切片放在顯微鏡的載物臺上,,用載物臺上的玻片夾固定好切片,,確保切片不會在觀察過程中移動。
通過載物臺的移動旋鈕,,將切片移動到物鏡下方,,使需要觀察的區(qū)域大致處于視野中心位置。
低倍鏡觀察
轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器,,將低倍物鏡(通常為 4 倍或 10 倍)轉(zhuǎn)至工作位置,,使物鏡對準(zhǔn)通光孔。
從側(cè)面注視物鏡,,同時(shí)轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,,使載物臺緩慢上升,直到物鏡接近切片(注意不要讓物鏡碰到切片,,一般距離切片約 0.5 - 1 厘米),。
從目鏡中觀察,緩慢轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,,使載物臺下降,,直到看到模糊的圖像。再轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,,使圖像清晰,。
利用載物臺的移動旋鈕,在低倍鏡下觀察整個(gè)組織切片,,了解切片的整體結(jié)構(gòu)和大致形態(tài),,確定需要進(jìn)一步觀察的重點(diǎn)區(qū)域。
高倍鏡觀察
將低倍鏡下確定的重點(diǎn)觀察區(qū)域移至視野中央,。
轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器,,換用高倍物鏡(通常為 40 倍或更高倍數(shù))。由于高倍物鏡的工作距離較短,,此時(shí)不能再使用粗準(zhǔn)焦螺旋,,只能通過轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋來微調(diào)焦距,使圖像清晰,。
在高倍鏡下仔細(xì)觀察組織切片的細(xì)節(jié),,如細(xì)胞形態(tài),、大小、排列方式,,細(xì)胞核的形態(tài),、染色質(zhì)分布,以及細(xì)胞間質(zhì)的結(jié)構(gòu)等,,注意觀察是否存在異常細(xì)胞或病變區(qū)域,。
調(diào)節(jié)光線
根據(jù)組織切片的染色情況和觀察需求,調(diào)節(jié)顯微鏡的光線,??梢酝ㄟ^調(diào)節(jié)孔徑光闌來控制進(jìn)入物鏡的光線量,孔徑光闌開大,,光線增強(qiáng),圖像對比度降低,;孔徑光闌縮小,,光線減弱,圖像對比度增加,。
還可以通過調(diào)節(jié)視場光闌來控制視野的亮度和范圍,,避免周圍雜散光的干擾,使觀察視野更加清晰,。
特殊觀察及記錄
如果需要進(jìn)行特殊觀察,,如相差觀察、熒光觀察等,,可根據(jù)顯微鏡的操作說明,,切換相應(yīng)的觀察模式,并選擇合適的濾光片等配件,。
使用顯微鏡配備的圖像采集系統(tǒng)(如數(shù)碼攝像頭)或連接電腦,,拍攝觀察到的圖像,記錄下有價(jià)值的觀察結(jié)果,,以便后續(xù)分析,、討論和報(bào)告撰寫。
觀察結(jié)束
觀察完畢后,,轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器,,將物鏡轉(zhuǎn)離通光孔,取下組織切片,。
關(guān)閉顯微鏡光源和電源,,清理顯微鏡,將顯微鏡恢復(fù)到初始狀態(tài),,妥善保管,。
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