2024 年 Restek 最新版液相色譜柱的使用 & 維護方法指南出爐啦!
從出廠報告,,硬件信息,LC 柱的安裝與使用,,柱子的維護,、清洗和保存......事無巨細,這份新版指南將為您帶來保姆級的攻略,,讓液相柱的使用更高效,、精準、壽命更長,!
色譜柱的出廠報告
為了確保每支液相色譜柱都具有好的性能、控制柱間差異,,Restek 會在出廠前對每支液相色譜柱進行柱效測試并出具測試報告,。報告中不僅包含測試條件、色譜圖,、測試結果,、保存溶劑,還包含色譜柱的專有信息:比如序列號和填料的批次號,。建議打印并隨色譜柱保存此報告,,以便后續(xù)排查故障時參考。
色譜柱硬件
所有 Restek 液相柱硬件均采用 316 不銹鋼制成,。粒徑為 2.7 μm 的 Raptor 核殼柱和粒徑大于 3 μm 的多孔硅膠色譜柱使用孔徑為 2 μm 的篩板,。其余液相柱均使用 0.5 μm 篩板,。
雖然 Restek 液相柱兩端接口可與 Valco、Parker,、Upchurch,、Swagelok 和其他品牌的 10-32 尺寸接頭兼容。但安裝新色譜柱時,,請確保連接管路與新色譜柱匹配,,如必要請更換連接件螺母和卡套。
擰緊色譜柱與連接件前,,請一定確保連接件與色譜柱兩端接頭連接正確,,否則新色譜柱的性能會受到不良影響(例如:柱效下降、峰形拖尾等)或發(fā)生滲漏,,甚至會使色譜柱難以拆卸,。Restek 液相柱兩端均自帶 PEEK 堵頭,安裝前擰下堵頭即可,。(有關色譜柱安裝的完整說明,,請參閱液相色譜儀的操作手冊)。
色譜柱安裝與使用
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流動相
液相柱出廠報告中標明了保存溶劑,。在使用前,請確保即將使用的流動相與保存溶劑互溶,;如果不互溶,,請用與保存溶劑和目標流動相均互溶的溶劑進行過渡。如果不確定溶劑是否互溶,,可聯(lián)系 Restek 技術支持,。
使用緩沖鹽溶液時需要特別小心,因為大多數色譜柱的出廠保存溶劑含有大于 50% 的有機溶劑,,一定用不含鹽的流動相做好過渡,,避免保存溶劑與緩沖鹽溶液接觸導致鹽類析出堵塞色譜柱。
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流向和流速
色譜柱簽中的箭頭指示了流向,,首先將色譜柱入口端連接到進樣器或自動進樣器端,,出口端用燒杯接好,用流動相(或活化溶劑)沖洗 10-15 分鐘,。逐漸將流速提升到最佳流速(見表 1)或使用流速,。然后停泵,將色譜柱出口端連接到檢測器,。
由于不同液相色譜儀器之間存在差異,,特別是在梯度洗脫模式下,您的結果可能與我們實驗室獲得的結果不同,,Restek 技術服務部可以幫助您優(yōu)化分離,,請記錄色譜柱使用中的工作壓力,,便于溝通時參考,。
表 1 : 不同粒徑、內徑色譜柱流速推薦表
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平衡
使用前,,建議用初始流動相平衡 5-10 個柱體積,。下文介紹了不同類型色譜柱平衡方法,更多信息,,詳詢 Restek 技術服務,。
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反相色譜柱平衡
柱體積計算公式
全多孔顆粒:V = 0.68 π r2 L,其中 V = 柱體積(以 mL 為單位),,r = 柱半徑(以 cm 為單位),,L = 柱長度(以 cm 為單位);
Raptor 核殼柱:柱體積 V = 0.50 π r2 L,。
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HILIC 色譜柱平衡
有關 HILIC 色譜柱平衡,,您可點擊此處查看詳細信息。
在安裝 HILIC 色譜柱之前,,請先用高比例有機相沖洗液相色譜管路 30-60 分鐘,;
開始使用新的 HILIC 色譜柱或改變流動相組成時,建議用至少 50 倍柱體積的流動相平衡,;
開始使用新批次色譜柱前,,應至少執(zhí)行 10 次空白進樣的完整洗脫程序;
兩次進樣之間的平衡時間,,視具體分析物而定,,因此請務必觀察保留時間的重現性,以確定重新平衡所需的時間,。
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Raptor EtG/EtS 色譜柱平衡
在新色譜柱上全梯度洗脫運行 30 次基質進樣,,可確保后續(xù)樣品分析過程中良好的重現性。
色譜柱維護
請在日常實驗中記錄系統(tǒng)壓力,,壓力升高提示需要及時維護液相色譜系統(tǒng):比如清洗色譜柱,、更換保護柱或在線過濾器。如果確認壓力升高由色譜柱引起,,可以反沖色譜柱以便除去入口篩板中堆積的顆粒來降低壓力(請注意:1.8 μm或 1.9 μm Force 和 Pinnacle DB 系列色譜柱不能反沖),。
反沖方法
停泵并斷開色譜柱連接,將色譜柱出口端連接到進樣器端,,另一端用燒杯接好(請勿將色譜柱接入檢測器),,使用與流動相兼容的溶劑沖洗色譜柱,流速推薦色譜柱最佳流速的 1/4 至 1/2,。反沖后,,將色譜柱正向連接,,用流動相重新平衡再使用。如果反沖有效,,壓力降低,,請考慮加保護柱或柱前過濾器進行以后的分析。
如果峰形因疑似污染而變差,,建議用高比例水相過渡到高比例有機相的流動相梯度沖洗色譜柱,,沖洗后,用流動相重新平衡,,并檢查柱效是否提高,。如果問題仍然存在,請考慮使用保護柱,。
色譜柱沖洗和保存
色譜柱使用完,、保存前,請至少用 10-20 倍柱體積的溶劑沖洗色譜柱,,以除去緩沖鹽,、酸或堿。
對于短期保存,,用不含緩沖鹽,、酸或堿的流動相沖洗色譜柱。對于長期保存,,反相色譜柱應保存在 50% 水- 50% 有機相(如乙腈或甲醇)中,,正相色譜柱應保存在非極性溶劑(例如正己烷)中。如果長期儲存溶劑與最近使用的流動相不互溶,,則用與兩者互溶的溶劑做好過渡,。色譜柱存放過程中,擰好堵頭,,并注明保存溶劑,。
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