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液相質(zhì)譜(LC-MS)中生物樣本預(yù)處理方法的選擇

來(lái)源:廣州萊奧實(shí)驗(yàn)室科技有限公司   2025年01月10日 17:08  

生物樣本分析主要考慮的問(wèn)題包括濃度低,、干擾多,、取樣少、個(gè)體差異大,、應(yīng)視樣品類型,、目標(biāo)分析物的性質(zhì)選擇合適的的樣品處理方法。

生物樣本預(yù)處理方法有

一,、蛋白沉淀法(PPT)

二,、液液萃取法(LLE)

三、固相萃取法(SPE)

四,、其他預(yù)處理方法:超濾膜過(guò)濾,、稀釋、柱切換、衍生化,、免疫親和萃?。↖AC)、酸或者酶水解,;

一,、蛋白沉淀法(PPT)

蛋白沉淀法(PPT)通過(guò)加入有機(jī)試劑、酸堿性試劑,、中性鹽和酶等蛋白沉淀劑,,是蛋白質(zhì)變性、達(dá)到除雜效果,。

優(yōu)點(diǎn):具有操作簡(jiǎn)單,、便捷、經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn),。

缺點(diǎn):大量樣品導(dǎo)致多次操作,,耗時(shí)長(zhǎng),效率低,,而且蛋白沉淀后的樣品凈化程度較低,,導(dǎo)致基質(zhì)效應(yīng),,目標(biāo)物響應(yīng)低,。

適用范圍:適合樣品量少的極性小分子化合物


液相質(zhì)譜(LC-MS)中生物樣本預(yù)處理方法的選擇

二,、液液萃取法(LLE)

液液萃取法(LLE)采用與水互不相溶的有機(jī)溶劑,,將目標(biāo)物從水相提取至有機(jī)相的方法。

優(yōu)點(diǎn):液液萃取法(LLE)適合非極性至中等極性的分析物,,具有富集濃縮效果,,減少基質(zhì)效應(yīng),成本低,,方法易轉(zhuǎn)移,,已開(kāi)發(fā)。

缺點(diǎn):不適用于親水極性物質(zhì),,操作中易污染,,耗時(shí)較長(zhǎng)

適用范圍:需要根據(jù)分析物性質(zhì),,考慮有機(jī)溶劑特性,、體積、pH對(duì)提取效果影響,;宜選擇對(duì)分析物溶解度大,、沸點(diǎn)低、易濃縮、與水不互溶,、無(wú)毒,、穩(wěn)定、不易乳化的溶劑,。

三,、固相萃取法(SPE)

SPE利用小柱不同填料類型,實(shí)現(xiàn)正相,、反相,、離子交換等等不同的分離模式,選擇性的保留分析物而使干擾物流出,,或反之,,達(dá)到凈化目的。

優(yōu)點(diǎn):適用生物樣本范圍廣,,可富集痕量樣本分析,。

缺點(diǎn):操作繁瑣,耗時(shí)長(zhǎng),,成本高,,需要豐富的操作技巧。

適用范圍:適用于從極性到非極性生物樣本多種類型的生物樣本,,可富集痕量樣本分析,。

96孔正壓固相萃取儀

液相質(zhì)譜(LC-MS)中生物樣本預(yù)處理方法的選擇

以上三種是生物樣本常見(jiàn)的預(yù)處理方法,奧96孔固相萃取儀可支持蛋白沉淀(PPT),、液液萃取(LLE),、固相萃取(SPE),可同時(shí)操作96個(gè)樣本,,簡(jiǎn)化操作步驟,,縮短萃取時(shí)間,通過(guò)氣動(dòng)控制,,保障很好的平行性和回收率,,排除因人員操作誤差而導(dǎo)致的結(jié)果不準(zhǔn)確。

四,、  其他預(yù)處理辦法:

稀釋法,,樣品經(jīng)一定體積的稀釋液稀釋后直接進(jìn)樣。

優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)單,,耗時(shí)少,,成本低

缺點(diǎn):不適用濃度低的樣本,基質(zhì)效果明顯,。

使用范圍:適用尿液,、淚液,、腦脊液等比較干凈樣本






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