據(jù)粗略估計(jì),，大約三分之一的細(xì)胞培養(yǎng)物都感染了支原體,。這些小東西神不知鬼不覺，侵入你的細(xì)胞,。由于它們體積小,，生長緩慢,，所以難以察覺。但是,，它們的存在又確實(shí)改變了細(xì)胞的代謝過程,，繼而干擾你的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，或造成無法解釋的差異,。更糟的是,，拯救被感染的細(xì)胞幾乎是不可能的任務(wù)。因此,，就支原體污染而言,，預(yù)防是第一要務(wù)。下面介紹了一些簡單的預(yù)防措施,，也許對你有用,。
細(xì)胞來源是關(guān)鍵
支原體污染的最常見原因之一是引入的培養(yǎng)物已經(jīng)被感染。一旦進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,，這些小東西會蔓延到每個角落,，讓你崩潰。要避免這種情況,，簡單的辦法就是不從其他實(shí)驗(yàn)室要細(xì)胞,，而從供應(yīng)商或菌種保藏中心（ATCC或ECACC）購買，這些細(xì)胞經(jīng)過嚴(yán)格檢測,，確保不含有支原體,。
如果購買有難度，或基于其他原因,，不得不使用其他實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞,，那么也要保持警惕，在單獨(dú)的培養(yǎng)箱中隔離,，同時進(jìn)行支原體的檢測,。上海瑞鹿生物科技公司提供多種支原體檢測試劑盒，可聯(lián)系咨詢自行選擇,。
定期檢測很重要
即使實(shí)驗(yàn)室沒有新來的細(xì)胞,，支原體也可能通過操作人員傳遞到現(xiàn)有的培養(yǎng)物。當(dāng)然,，操作人員并不知道,。支原體污染的另一條路線是通過你的細(xì)胞培養(yǎng)試劑。培養(yǎng)基,、酶這些常用試劑,，也有可能被支原體污染。
盡管無法避免人或試劑的污染,，但常規(guī)檢測也能避免情況惡化,。也許,，當(dāng)支原體初次感染時，我們未必能檢測到,，但盡早發(fā)現(xiàn),，就能防止這種微生物的傳播，避免大的損失,。
支原體檢測有很多種,。直接培養(yǎng)方法雖然準(zhǔn)確率高，但需要三到四周的時間,。因此,，我們在常規(guī)檢測中使用間接檢測方法已足夠，若發(fā)現(xiàn)陽性,，則后續(xù)可采用較為繁瑣的直接檢測,。常見的間接檢測方法有基于酶活性的熒光和生化分析、PCR分析,、免疫分析等,。
無菌操作要做好
支原體污染的另一個主要源頭是無菌操作不佳。盡管良好的操作可能是簡單的預(yù)防措施,，但說起來容易,，做起來難。每個人都會犯錯,，特別是在重復(fù)勞動時,。因此，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)不定期開展培訓(xùn)和監(jiān)督,，以便讓每個人都充分認(rèn)識到支原體的破壞性,。
許多實(shí)驗(yàn)室目前仍使用抗生素，但細(xì)胞培養(yǎng)人員逐漸認(rèn)識到這是不負(fù)責(zé)任的,，因?yàn)樗鼛砹四退幬⑸锏膯栴},。相反，最好依賴自身的無菌操作來預(yù)防支原體,，而只有在懷疑或確認(rèn)感染的時候才使用抗生素。
保藏細(xì)胞防萬一
最后,，通過低溫保藏儲備一些細(xì)胞,，以防支原體大面積來襲。如果支原體有抬頭的跡象,，或常規(guī)檢測呈陽性結(jié)果,，那么可靠的補(bǔ)救措施是扔掉所有培養(yǎng)物，清潔培養(yǎng)箱和超凈臺,，一切從頭開始,。當(dāng)然,，你得確保儲備的細(xì)胞是不含支原體的。