Shimadzu LC-40D高效液相色譜儀,；

色譜柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×250 mm,；P/N：380-01230-01）,；

純水機(jī)：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；

SHIMSEN Disc HPPTFE針式過濾器（P/N：380-00341）,；

LC-MS認(rèn)證樣品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）,；

Nichipet Air移液槍：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；

Nichipet Air 10-100 μL（P/N：00-NAR-100）,；

Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）,；

Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-10000）。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

稱取生物素標(biāo)準(zhǔn)品適量,，加水溶解并配置成濃度分別為 40 μg/mL和2 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,。

1.3 試樣處理

稱取研磨為粉末的試樣2.0 g，加水25 mL，超聲提取20 min,，冷卻,，搖勻，離心,，取上清液過0.22 μm濾膜,，即得。

1.4 分析條件

色譜柱：ShimNex CS C18（5 μm,，4.6×250 mm,；P/N：380-01230-01）

柱溫：37 ℃

檢測器：PDA 200 nm

流速：0.6 mL/min

進(jìn)樣量：20 μL

流動(dòng)相：A：0.05 mol/L 磷酸二氫鉀（用磷酸調(diào)節(jié)pH 為3.5）

B：乙腈

按照上述色譜條件（1.4）進(jìn)行采集，標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液色譜圖如下：