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液相色譜儀的使用教程

來源:濟(jì)南明曉工業(yè)技術(shù)有限公司   2024年12月19日 15:26  

液相色譜儀的使用教程

液相色譜儀的使用教程詳細(xì)步驟如下:

一,、開機(jī)前準(zhǔn)備

1.流動(dòng)相準(zhǔn)備:

根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的流動(dòng)相,,如甲醇,、乙腈、水等,,以及相應(yīng)的添加劑(如緩沖鹽等),。

使用合適的濾膜(有機(jī)系或水系,常用孔徑為0.20μm或0.45μm)對流動(dòng)相進(jìn)行過濾,,以去除雜質(zhì),。

對過濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10~20分鐘,去除溶解在其中的氣體,,防止在儀器中形成氣泡影響分析結(jié)果,。

2.樣品準(zhǔn)備:

確保樣品溶解均勻且無雜質(zhì)。如果樣品是固體,,需要將其溶解在合適的溶劑中,;如果樣品是液體,需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尰蚯疤幚怼?/p>

3.色譜柱選擇:

根據(jù)樣品的性質(zhì)和分析目的選擇合適的色譜柱,。例如,,對于極性較大的樣品,可選擇反相色譜柱(如C18柱),;對于極性較小的樣品,,正相色譜柱可能更合適。

注意色譜柱的規(guī)格(如長度,、內(nèi)徑,、粒徑等)對分離效果的影響。

二,、開機(jī)

1.打開硬件設(shè)備:先打開計(jì)算機(jī),,進(jìn)入操作系統(tǒng)后,再打開液相色譜儀的各個(gè)模塊電源,,如泵,、檢測器、柱溫箱等。

2.打開軟件:雙擊液相色譜儀的工作站軟件圖標(biāo),,進(jìn)入軟件操作界面,。

三、系統(tǒng)初始化和平衡

1.沖洗系統(tǒng):

在儀器操作界面中設(shè)置泵的參數(shù),,用甲醇或其他合適的溶劑作為初始流動(dòng)相,,以一定的流速?zèng)_洗整個(gè)液相色譜系統(tǒng),包括泵,、管路、進(jìn)樣閥,、色譜柱和檢測器等,。

沖洗時(shí)間一般為20~30分鐘,目的是去除系統(tǒng)中的雜質(zhì)和殘留物質(zhì),,同時(shí)檢查系統(tǒng)是否存在漏液等問題,。

2.設(shè)置柱溫:

根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,在柱溫箱上設(shè)置合適的溫度,,使色譜柱達(dá)到穩(wěn)定的工作溫度,。

柱溫的設(shè)置需要考慮色譜柱的類型、樣品的性質(zhì)以及分析方法的要求,。

3.基線穩(wěn)定:

在沖洗過程中,,觀察檢測器的信號,等待基線穩(wěn)定,?;€穩(wěn)定的標(biāo)準(zhǔn)通常是基線的波動(dòng)在一定范圍內(nèi),且在一段時(shí)間內(nèi)保持相對穩(wěn)定,。

這可能需要30分鐘或更長時(shí)間,,具體取決于儀器的狀態(tài)和分析方法。

四,、方法設(shè)置

1.泵參數(shù)設(shè)置:設(shè)置流動(dòng)相的流速,、比例等參數(shù)。如果是梯度洗脫,,還需要設(shè)置梯度程序,,即不同時(shí)間點(diǎn)流動(dòng)相的組成變化。

2.檢測器參數(shù)設(shè)置:設(shè)置檢測波長,、帶寬,、響應(yīng)時(shí)間等參數(shù)。根據(jù)樣品的特性和分析目的選擇合適的檢測波長,,以獲得檢測效果,。

3.其他參數(shù)設(shè)置:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,還可以設(shè)置其他相關(guān)參數(shù),如柱溫箱的溫度控制程序,、數(shù)據(jù)采集的頻率等,。

五、進(jìn)樣分析

1.進(jìn)樣前準(zhǔn)備:

如果是自動(dòng)進(jìn)樣器,,將樣品瓶放入自動(dòng)進(jìn)樣器的樣品架上,,并在軟件中設(shè)置好樣品信息。

如果是手動(dòng)進(jìn)樣器,,用洗針液洗凈進(jìn)樣針,,再用樣品溶液潤洗進(jìn)樣針3遍以上,并排除針筒中的氣泡,。

2.進(jìn)樣操作:

對于自動(dòng)進(jìn)樣器,,在軟件中點(diǎn)擊開始進(jìn)樣按鈕,自動(dòng)進(jìn)樣器會(huì)按照設(shè)定的程序進(jìn)行進(jìn)樣,。

對于手動(dòng)進(jìn)樣器,,將進(jìn)樣針插入進(jìn)樣閥的進(jìn)樣口,緩慢注入樣品溶液,,然后切換進(jìn)樣閥的位置,,啟動(dòng)進(jìn)樣程序。

進(jìn)樣完成后,,記錄樣品的名稱,、進(jìn)樣時(shí)間等信息。

六,、數(shù)據(jù)處理和分析

1.數(shù)據(jù)采集:在進(jìn)樣后,,液相色譜儀會(huì)自動(dòng)采集樣品的色譜數(shù)據(jù),并將其傳輸?shù)接?jì)算機(jī)上的工作站軟件中,。

2.數(shù)據(jù)處理:對采集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,,包括積分、峰識別,、峰面積計(jì)算,、保留時(shí)間確定等??梢愿鶕?jù)需要設(shè)置積分參數(shù),、峰的判定標(biāo)準(zhǔn)等,以獲得準(zhǔn)確的分析結(jié)果,。

3.數(shù)據(jù)分析:根據(jù)處理后的數(shù)據(jù),,對樣品的組成、含量,、純度等進(jìn)行分析和判斷,??梢酝ㄟ^比較樣品的色譜圖與標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖,或者使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法等方法進(jìn)行定量分析,。

七,、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的處理

1.樣品處理:取出樣品瓶,將剩余的樣品進(jìn)行妥善處理,,如回收,、廢棄等。

2.系統(tǒng)清洗:

用適當(dāng)?shù)娜軇ㄈ缂状?、水等)沖洗液相色譜系統(tǒng),,特別是泵、進(jìn)樣閥和色譜柱等部件,,以去除殘留的樣品和流動(dòng)相,。

清洗時(shí)間一般為30分鐘以上,確保系統(tǒng)清洗干凈,。如果使用過含鹽緩沖液,則必須先用清水沖洗泵15分鐘,,再?zèng)_洗干凈系統(tǒng)內(nèi)其他含鹽的部位,,最后用純的強(qiáng)溶劑沖洗整個(gè)系統(tǒng)以保護(hù)色譜柱。

八,、關(guān)機(jī)

1.先關(guān)閉液相色譜儀的軟件,。

2.依次關(guān)閉檢測器、泵,、柱溫箱等模塊的電源,。

3.關(guān)閉計(jì)算機(jī)。

請注意,,不同型號的液相色譜儀可能在操作細(xì)節(jié)上存在差異,,因此在實(shí)際使用時(shí),建議參考具體儀器的說明書或咨詢儀器供應(yīng)商以獲取準(zhǔn)確的操作指導(dǎo),。

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