ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗方法簡稱酶標(biāo)法,，是標(biāo)記技術(shù)中的一種,，是從熒光抗體技術(shù)，同位素免疫技術(shù)發(fā)展而來的一種敏感,，特異,，快速并且能自動化的現(xiàn)代技術(shù)。 

酶標(biāo)法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯(lián)劑結(jié)合為酶標(biāo)抗原或抗體,，此酶標(biāo)抗原或抗體可與固相載體上或組織內(nèi)相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生特異反應(yīng),，并牢固地結(jié)合形成仍保持活性的免疫復(fù)合物。當(dāng)加入相應(yīng)底物時,，底物被酶催化而呈現(xiàn)出相應(yīng)反應(yīng)顏色,。顏色深淺與相應(yīng)抗原或抗體含量成正比。

 由于此技術(shù)是建立在抗原-抗體反應(yīng)和酶的高效催化作用的基礎(chǔ)上,，因此,，具有高度的靈敏性和特異性,，是一種極富生命力的免疫學(xué)試驗技術(shù)。

光通過被檢測物,，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系,。

檢測單位用OD值表示,， OD是optical density（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度,， OD=log（1/trans）,，其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,，OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：

E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度,， Ιo 為在檢測物之前的光強(qiáng)度，Ι為從被檢測物出來的光強(qiáng)度,。

OD值由下述公式計算：

c為檢測物的濃度 b為檢測物的厚度 a為摩爾因子,。

在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下,，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量,。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確,。因此,，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測,，稱為測量波長,。

但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收,，我們再選取一個參照波長,，以消除這個不準(zhǔn)確性。在參照波長下,，檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收,。

儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量,，轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號，最大為4095,。儀器定義沒有光源下的透光值為 0%,，沒有檢測物的透光值為100%。則實際檢測中,，檢測物的透光值均在 0%一100%之間,。

透光值的計算如下：

T=（Meas—Min）/（Max—Min）

其中T為透光值,， Meas為檢測的二進(jìn)位數(shù)值， Min為在 0%的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值,， Max為在100%的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值,，舉例如下：

MaX=3600

Min=20

Meas=30

T=（30-20）/3600-20)=0．0028

OD=log（1/T）=log（1/0.0028）=2.552