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在液相色譜方法開發(fā)時(shí)選擇合適的有機(jī)溶劑需要考慮幾大關(guān)鍵因素（見最后的表格）。其中，黏度是重要因素之一,，因?yàn)楦?span style="max-width: 100%;line-height: 24.5px;box-sizing: border-box !important;overflow-wrap: break-word !important;">黏度溶劑會(huì)產(chǎn)生高背壓，因而可能會(huì)對(duì)儀器系統(tǒng)帶來限制,。
其它重要的溶劑特征還包括UV截止波長和極性指數(shù)：UV截止波長較高會(huì)導(dǎo)致UV/Vis檢測的靈敏度不佳,，而溶劑的極性指數(shù)較低則往往會(huì)導(dǎo)致化合物洗脫較快，因而通常用于色譜柱的清洗,。
優(yōu)選溶劑：
乙腈,、甲醇、丙酮
乙腈 毫無疑問是優(yōu)選的有機(jī)溶劑,，因?yàn)槠湓谂c水的混合體系中產(chǎn)生的系統(tǒng)背壓極低,，而且UV截止波長也很低，因此UV/Vis檢測的靈敏度更高,。
甲醇 是另一種常用的有機(jī)溶劑,，它的洗脫強(qiáng)度與乙腈相當(dāng)，UV吸收相對(duì)其他溶劑也較低,，而且價(jià)格比乙腈便宜得多,。甲醇的主要缺點(diǎn)是粘度較大帶來的高背壓，尤其是在使用小粒徑的HPLC色譜柱時(shí)更為明顯,。
雖然丙酮 的UV吸收較高,，但如果分析物在較高的UV波長進(jìn)行檢測，或者使用其它類型檢測器,，如質(zhì)譜或ELSD,，則丙酮也可以進(jìn)行有效的使用。
次選溶劑：
乙醇,、異丙醇/正丙醇,、四氫呋喃
一般不建議使用乙醇，因?yàn)槠湓谂c水的混合體系中產(chǎn)生很高的背壓,。但是有時(shí)乙醇對(duì)于針對(duì)成品的制備方法來說是優(yōu)先選擇,，因?yàn)樗梢员苊馊軇埩簟?/p>
異丙醇和正丙醇 的洗脫強(qiáng)度較高,，也是色譜柱進(jìn)行低流速清洗最丨常用的溶劑，但是它們同樣會(huì)產(chǎn)生較高的背壓,。另外,，它們是很好的助溶劑，在分析完整蛋白時(shí)經(jīng)常被使用,。
四氫呋喃 的洗脫強(qiáng)度與正丙醇相當(dāng),，但由于較昂貴所以不太常用。但是,，它可以作為脂肪或高色素樣品的清洗或再生溶劑,。
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