PCR實(shí)驗(yàn)DNA復(fù)制酶系作用順序
DNA的半保留復(fù)制:
DNA復(fù)制時(shí),,以親代DNA的兩條鏈分別作為模板,,在DNA聚合酶的催化下,按堿基互補(bǔ)的原則合成兩條與模板鏈互補(bǔ)的新鏈,組成新的DNA分子,,新形成的兩個(gè)子代DNA與親代DNA的堿基順序全一樣,。由于子代DNA分子中一條鏈來(lái)自親代,而另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻?,因此這種復(fù)制方式稱為半保留復(fù)制(semi-conservative replication),。
DNA的復(fù)制過(guò)程:
DNA復(fù)制酶系作用順序:
1. 拓?fù)洚悩?gòu)酶
使DNA超螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi),形成其基本的雙螺旋結(jié)構(gòu),。
2. 解鏈酶
使DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi),,堿基間氫鍵斷裂,形成兩條單鏈DNA,,構(gòu)成”復(fù)制叉“,。
3. 單鏈DNA結(jié)合蛋白
單鏈DNA結(jié)合蛋白結(jié)合在兩條單鏈DNA上,穩(wěn)定單鏈DNA,,阻止DNA復(fù)性,,避免被核酸酶降解,便于復(fù)制子代DNA ,。
4. 引物酶
是一種依賴DNA的RNA聚合酶,,該酶以DNA為模板,聚合一段RNA短鏈引物,,以提供自由的3'-OH,,形成引發(fā)體,使子代DNA鏈能夠開(kāi)始聚合,。
5. DNA聚合酶
由于DNA聚合酶只能以5'→3'方向聚合子代DNA鏈,,即模板DNA鏈的方向必須為3'→5'。因此,,分別以兩條親代DNA鏈作為模板聚合子代DNA鏈時(shí)的方式是不同的,。
以3'→5'方向的親代DNA鏈作模板的子鏈,,在復(fù)制時(shí)連續(xù)合成,,子鏈的聚合方向?yàn)?'→3',這一條新合成的子鏈被稱為前導(dǎo)鏈(leading strand),。以5'→3'方向的親代DNA鏈為模板,,合成子鏈的過(guò)程不連續(xù),這條鏈被稱為隨從鏈(lagging strand)或滯后鏈,。
DNA雙鏈在復(fù)制時(shí)逐步解開(kāi),,因此隨從鏈的合成是一段一段的。DNA在復(fù)制時(shí),,由隨從鏈所形成的一些子代DNA短鏈稱為岡崎片段 (Okazaki fragment),。
6. DNA連接酶
在DNA連接酶的催化下,形成最后一個(gè)磷酸酯鍵,,將岡崎片段連接起來(lái),,形成完整的DNA長(zhǎng)鏈,。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載,、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任,。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),,不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體,、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
- 如涉及作品內(nèi)容,、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利,。