如何選擇細菌接種方法
一、劃線法
用途:主要用于菌種分純,,獲得單菌落,。
實驗步驟:由接種環(huán)沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進行平行劃線,、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線(詳見圖1),,微生物細胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少,,并逐步分散開來,,如果劃線適宜的話,,微生物能一一分散,經(jīng)培養(yǎng)后,,可在平板表面得到單菌落,。
優(yōu)點:可以觀察菌落特征,對混合菌進行分離,。
缺點:不能用于菌落計數(shù),。
二、涂布法
用途:主要用于菌落總數(shù)計數(shù),。
實驗步驟:先將培養(yǎng)基熔化后趁熱倒入無菌平板中,,然后用無菌吸管吸取0.1ml菌液接種在已凝固的瓊脂平板上。再用無菌玻璃棒將菌液在平板上涂抹均勻,將涂抹好的平板平放于桌上20~30min使菌液滲透入培養(yǎng)基內(nèi),,然后將平板倒轉(zhuǎn),,保溫培養(yǎng),至長出菌落后即可計數(shù),。
三,、傾倒法
用途:主要用于菌落總數(shù)的計數(shù)。
實驗步驟:吸取1ml菌液加入平板中,,倒入已融化并冷卻至45~50℃的細菌培養(yǎng)基,,輕輕轉(zhuǎn)動平使菌液與培養(yǎng)基混合均勻,冷凝后倒置,,適溫培養(yǎng),。至長出菌落后即可計數(shù)。
四,、斜面接種法
用途:主要用于保存菌種,,或觀察細菌的某些生化特性和動力。
實驗步驟:用接種環(huán)或接種針伸入菌種管內(nèi),,挑取用來移種的菌落。伸入斜面培養(yǎng)管內(nèi),,先從斜面底部到頂端拖一條接種線,,再自下而上蜿蜒劃線,或直接自下而上地蜿蜒劃線,。接種完成之后,,用火焰滅菌培養(yǎng)管口,并塞上棉塞,,置于37℃培養(yǎng)
五,、液體培養(yǎng)基接種法
用途:主要用于菌液比濁實驗,。
實驗步驟:用滅菌接種環(huán)挑取菌落或標本,在試管內(nèi)壁與液面交界處輕輕研磨,,使細菌均勻得散落在液體培養(yǎng)基中,。
六、螺旋接種法
用途:此法主要用于菌落總數(shù)計數(shù),。
Spiral plater 可以在無任何全部或中間稀釋的情況下快速細菌接種,。對數(shù)減少的樣品容量以阿基米德螺旋線的形式被自動分注在旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)基上每一點的容量可以被知曉和校準,。菌液的濃度可以通過培養(yǎng)皿上一定區(qū)域的菌落數(shù)量除以同區(qū)域樣品分注量來計算,。
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