用3.5%PEG選擇性地沉淀血清中CIC,繼之用胰蛋白酶消化沉淀物中的抗體蛋白,分離出抗原部分,,用反向間接血凝法測(cè)定HBsAg滴度,。與不加胰蛋白酶的對(duì)照管比較,,如HBsAg滴度升高,則說(shuō)明有HBsAg-CIC的存在,。
1.試劑
①pH8.4硼酸鹽緩沖液(BBS):配制法同*節(jié)中PEG沉淀試驗(yàn),;
②7%PEG及3.5%PEG溶液:用BBS配制;
③10mg/mL胰蛋白酶溶液:用pH8.2巴比妥緩沖液配制,。
2.操作步驟
(1)在測(cè)定管與對(duì)照管內(nèi)務(wù)加待測(cè)血清0.2mL,。
(2)兩管各加pH8.4BBSl.8mL,將血清作1:10稀釋,。
(3)各加7%PEG 2mL,,充分混勻后,4~C冰箱放置18h,。
(4)在10%左右條件下2 500r/min離心20min,,棄上清
(5)將沉淀物懸浮于4mL 3.5%PEG溶液中,2 500r/rain離心20min,,棄上清,。
(6)于測(cè)定管中加入0.2mL胰蛋白酶溶液,對(duì)照管加0.2mLBBS,,混勻后置37%水浴30rain,,其間振蕩3—4次。取出后,,立即置56%水浴5min,。
(7)將測(cè)定管、對(duì)照管及未經(jīng)處理的血清分別作系列倍比稀釋,,用反向間接血凝試驗(yàn)檢測(cè)HBsAg滴度,。
3.結(jié)果判斷
①測(cè)定管HBsAg滴度在1/16以上,且滴度高于對(duì)照管1個(gè)稀釋度以上者為HBsAg-CIC陽(yáng)性,;
②測(cè)定管與對(duì)照管HBsAg滴度相同,,但其滴度高于血清游離HBsAg1個(gè)稀釋度以上者也為HBsAg-CIC陽(yáng)性。
4.臨床意義 胰蛋白酶解離法檢測(cè)HBs-Ag-CIC簡(jiǎn)便而敏感,,有助于確定乙肝病程中有無(wú)抗原特異性復(fù)合物形成,,估計(jì)是否有可能形成肝外系統(tǒng)病變。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者,,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,,目的在于傳遞更多信息,,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任,。其他媒體,、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。