【原理概述】 

本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴(kuò)增技術(shù)：在常溫恒溫下（一般為 39 oC~42 oC）,， 在輔助蛋白和單鏈結(jié)合蛋白的幫助下,，重組酶和引物形成復(fù)合體,；進(jìn)行同源搜索并結(jié)合目的同源域,，此時(shí)在該同源位置形成D-loop 區(qū)并開始進(jìn)行鏈交換,；伴隨著重組酶從復(fù)合體上解離,，聚合酶也結(jié)合到引物的 3’末端,，開始鏈的延伸。依賴nfo 酶的作用,，加入根據(jù)模板設(shè)計(jì)的特異的分子探針,，使用膠體金技術(shù)（三明治夾心法）可以對(duì)最終結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)。

【產(chǎn)品特點(diǎn)】 

本試劑盒具有靈敏度高,、特異性強(qiáng),、反應(yīng)時(shí) 間短（僅需 15 min）等優(yōu)點(diǎn)，反應(yīng)組分為干粉狀態(tài),，操作簡(jiǎn)便,，易于保存。 本試劑對(duì)設(shè)備要求低,，金屬浴,、水浴鍋等即 可進(jìn)行反應(yīng)操作，無需購(gòu)買 PCR 擴(kuò)增儀等 價(jià)格高昂的專屬設(shè)備,。

【引物設(shè)計(jì)】 

建議使用長(zhǎng)度在30-35 bp 的引物,，引物過短會(huì)影響擴(kuò)增速度和檢測(cè)靈敏度；下游引物的 5’端標(biāo)記一個(gè)修飾基團(tuán)（常用生物素）,。引物設(shè)計(jì)避免形成二級(jí)結(jié)構(gòu)而影響擴(kuò)增,；擴(kuò) 增子長(zhǎng)度建議在150-500 bp。

【膠體金探針設(shè)計(jì)】

在上下游引物中間,，設(shè)計(jì)一段長(zhǎng)度為46-52nt 與目的片段互補(bǔ)的序列,；5’端修飾一個(gè)抗原 標(biāo)記（典型 FAM）；在 5’端和 3’末端的中部 位置標(biāo)記一個(gè) dSpacer（四氫呋喃,，THF）,， 作為 nfo 的識(shí)別位點(diǎn),；3’末端標(biāo)記一個(gè)修飾 基團(tuán)，例如胺基,、磷酸基團(tuán)或 C3-Spacer 等,。

【試劑盒儲(chǔ)存】 

1．儲(chǔ)存條件：儲(chǔ)存溫度 ≤ -20 °C 恒溫環(huán)境， 避光保存,，避免重壓,； 

2．產(chǎn)品有效期：14 個(gè)月； 

3．生產(chǎn)日期見外包裝,。

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