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蛋白 A/G 磁珠是一種常用的抗體純化工具,，其通過特異性結合抗體的Fc段,，實現(xiàn)對目標抗體的高效富集和純化。
一,、準備工作
材料準備
蛋白 A/G 磁珠
待純化的抗體樣品
緩沖液
磁力架
離心管
磁珠預處理
根據(jù)磁珠的使用說明,，進行必要的預處理。
二、純化步驟
抗體樣品準備
將待純化的抗體樣品置于合適的離心管中,。
磁珠結合
將適量的蛋白 A/G 磁珠加入抗體樣品中,，輕輕混勻。
在室溫下緩慢旋轉或振蕩一定時間,，使抗體與磁珠充分結合,。
磁分離
將離心管放置在磁力架上，靜置一段時間,，使磁珠聚集在磁場邊緣,。
去除上清液，保留磁珠與抗體的復合物,。
洗滌
加入適量的洗滌緩沖液,，輕輕混勻后再次進行磁分離。
重復洗滌步驟數(shù)次,，以去除未結合的雜質(zhì),。
抗體洗脫
加入適當?shù)南疵摼彌_液（通常為低pH緩沖液），輕輕混勻,。
室溫下靜置一段時間后,，再次進行磁分離。
收集上清液,，即為純化的抗體,。
三、技巧與注意事項
控制結合時間
結合時間過短可能導致抗體結合不全,，過長則可能影響抗體活性,。需根據(jù)實際情況調(diào)整。
選擇合適的緩沖液
不同的抗體可能對緩沖液的要求不同,，需根據(jù)抗體的性質(zhì)選擇合適的緩沖液,。
洗滌
洗滌步驟要完整，以確保去除雜質(zhì),，但也要避免過度洗滌導致抗體損失,。
注意pH值
洗脫緩沖液的pH值要適當，過低可能導致抗體變性,，過高則可能導致洗脫效果不佳,。
避免污染
在整個操作過程中，要注意無菌操作,，避免交叉污染,。
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