Waters Symmetry色譜柱清洗與再生:
如果發(fā)生峰形改變,、峰分叉,、出現肩峰,、保留時間改變、分離度變化或柱壓升高,,說明色譜柱可能已被污染,。通常情況下,用純有機溶劑進行沖洗(小心避免緩沖液出現沉淀)就足以去除污染物,。如果沖洗不能解決問題,,可采用以下清洗和再生步驟灌注色譜柱。請根據樣品和/或您認為污染色譜柱的物質的性質,,選擇與之匹配的常規(guī)清洗方法(見表1),。用20倍柱體積(例如對于4.6 × 250 mm色譜柱,使用80 mL溶劑)HPLC級溶劑沖洗色譜柱,。將流動相溫度升至35 °C~55 °C可以提高清潔效率,。如果清洗和再生之后色譜柱性能仍然很差,,請聯(lián)系我公司。
表1:色譜柱清洗溶劑使用順序和其他選項
保護柱需要根據樣品污染情況定期更換,。當系統(tǒng)背壓穩(wěn)步上升至設定壓力限值時,,通常表明需要更換保護柱。突然出現分叉峰也表明需要更換保護柱,。
Waters Symmetry色譜柱存放:
為了盡可能延長色譜柱壽命和提高性能,,使用色譜柱之后請用100乙腈保存保存色譜柱。請wu使用含緩沖液或鹽的水性流動相保存色譜柱,。如果流動相洗脫液中含有酸/堿性添加劑,、緩沖液或鹽,請先用至少10倍柱體積(常用色譜柱的柱體積見表2)HPLC級水沖洗色譜柱,,再用至少15倍柱體積HPLC級100乙腈沖洗色譜柱,,然后再儲存。如果不執(zhí)行這些步驟,,可能導致緩沖鹽在色譜柱內沉淀,。使用隨附的端塞wan全密封色譜柱,防止溶劑蒸發(fā)導致柱床變干,。
表2.空色譜柱體積(mL)(乘以10得到沖洗溶劑體積)
注:如果色譜柱運行了含甲酸鹽(如甲酸銨,、甲酸等)的流動相,并且之后使用100乙腈進行沖洗,,那么在重新安裝色譜柱并再次運行含甲酸鹽的流動相時,,柱平衡花費的時間可能略長。
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