液相色譜柱作為液相色譜分析不可少的分析助手,，如何正確操作使用色譜柱,，避免柱效降低。
避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動

溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況,；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此,，在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。

逐漸改變?nèi)軇┑慕M成

特別是反相色譜中,，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/span>

色譜柱一般不能反沖

一般來說色譜柱不能反沖,，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí)，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì),。否則反沖會迅速降低柱效,。

使用適宜的流動相

選擇使用適宜的流動相(尤其是pH)，以避免固定相被破壞,。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,，分析柱是鍵合硅膠時(shí)，預(yù)柱為硅膠,，可使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱

經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì),。在進(jìn)行清洗時(shí)，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,。

禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜

保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊,，防止溶劑揮發(fā)干燥,。 禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時(shí)間。

色譜柱損壞及時(shí)處理

色譜柱使用過程中,，如果壓力升高,，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗,；另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi),，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形,，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,，死體積增大。在后兩種情況發(fā)生時(shí),，小心擰開柱接頭,，用潔凈小鋼將柱頭填料取出1～2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內(nèi)填料整平。然后用適當(dāng)溶劑濕潤的固定相(與柱內(nèi)相同)填滿色譜柱,，壓平,，再擰緊柱接頭。這樣處理后柱效能得到改善,，但是很難恢復(fù)到新柱的水平,。

柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱(5～30mm)，可以起到保護(hù),、延長柱壽命的作用,。采用保護(hù)柱會損失一定的柱效，這是值得的,。通常色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達(dá)2年以上,。以硅膠為基質(zhì)的填料，只能在pH=2～9范圍內(nèi)使用,。柱子使用一段時(shí)間后,，可能有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)保留于柱頂，特別是一些有色物質(zhì)更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙稀?/span>

注意維護(hù)新液相色譜柱

新的液相色譜柱在使用一段時(shí)間后柱頂填料可能塌陷,，使柱效下降,，這時(shí)也可補(bǔ)加填料使柱效恢復(fù)。每次工作完后,，最好用洗脫能力強(qiáng)的洗脫液沖洗,，例如，ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡,。當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動相時(shí),，使用完后應(yīng)用無鹽流動相沖洗。含鹵族元素(氟,、氯,、溴)的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道，不宜長期與之接觸,。裝在HPLC液相色譜儀上柱子如不經(jīng)常使用,，應(yīng)每隔4～5天開機(jī)沖洗15分鐘。