D型-過氧化酶活化增生受體抗體技術(shù)的實驗步驟:
一,、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水,、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油,、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只,、熒光顯微鏡,、玻片架、濾紙、37℃溫箱等,。
二,、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,,十分鐘后棄去,,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標記的抗體溶液,,使其覆蓋標本,,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考,。
3.取出玻片,,置玻片架上,先用0.01mol/L,,pH7.4的PBS沖洗后,,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,,每缸三到五分鐘,,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,,用濾紙吸去多余水分,,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,,以蓋玻片覆蓋,。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,。
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