Question 1,、ShimNex HE SAX/SCX以及WP SAX/SCX色譜柱怎么活化?
1. 需要使用至少20倍柱體積的流動相平衡色譜柱。
2. 當流動相中緩沖鹽濃度較高時候,為了防止鹽在色譜柱或系統(tǒng)中析出,,可使用20%的乙腈水溶液沖洗5倍以上柱體積作為緩沖,再過渡到流動相,。
3. 因為SCX色譜柱鍵合的基團是磺酸基團,,容易與醇類物質(zhì)發(fā)生酯化反應,所以流動相應當避免醇的使用,。
Question 2. ShimNex HE CN色譜柱的活化,?
氰基柱既可以用在正相模式,又可以用于反相模式,??紤]到色譜柱壽命,推薦使用過程中固定為其中一種模式,。因色譜柱出廠時使用庚烷:乙酸乙酯=90:10進行質(zhì)控,所以如需要使用反相模式,,請先使用異丙醇等將柱內(nèi)的溶劑進行充分置換后再用相應的流動相進行活化操作,。
Question 3. C4 色譜柱怎么活化?
一般C4色譜柱的活化參照C18色譜柱,,第一次使用色譜柱前,,應先用20倍柱體積以上的甲醇/乙腈充分活化。為確保數(shù)據(jù)的質(zhì)量,,分析前應使用至少 10 倍柱體積的流動相平衡色譜柱,。 若流動相中緩沖鹽濃度較高, 為了防止鹽在色譜柱或系統(tǒng)中析出,,應先使用與流動相構(gòu)成比例相同或有機相比例較低的水溶液沖洗至少 5 倍柱體積,,再過渡到流動相。
Question 4. ShimNex HE SAX/SCX以及WP SAX/SCX怎么沖洗,?
硅膠基質(zhì)的離子交換色譜柱一般流失比較嚴重,,壽命一般不是很好,。所以色譜柱的清洗維護非常重要。色譜柱的污染可能會導致峰形的變化,、峰分裂,、肩峰、柱效的變化或背壓增加等問題,。請參考以下方法進行清洗:
0.1%乙酸(5倍柱體積)>0.3M 磷酸鹽緩沖液,,含0.1%乙胺四乙酸(pH7)(20倍柱體積)>0.1%乙酸(10倍柱體積)>乙腈(5倍柱體積)>異丙醇(20倍柱體積)>乙腈(5倍柱體積)
Question 5. 硅膠基質(zhì)色譜柱的保存有什么注意事項?
Question 6. 氨基酸分析儀中,,使用的Amino Na/Li型色譜柱,,色譜柱怎么活化?
在使用長期停止使用的色譜柱之前,,用0.2M氫氧化鈉水溶液沖洗數(shù)小時,。
Question7. 氨基酸分析儀中,使用的Shim-pack Amino Na/Li型色譜柱,,色譜柱臟了的時候怎么沖洗,?
進行氨基酸分析后,首先可以選擇0.2M氫氧化鈉清洗鈉型色譜柱,,用0.2M的氫氧化鋰清洗Li型色譜柱,,此外還可以選擇酸性流動相和EDTA溶液進行清洗。
酸洗主要針對Li型以及Na型色譜柱,,采用0.1M 硝酸沖洗數(shù)小時,,然后使用0.2M氫氧化鈉清洗鈉型色譜柱或者0.2M的氫氧化鋰清洗Li型色譜柱幾個小時。EDTA沖洗,,采用0.2M EDTA·2Na(乙二胺四乙酸二鈉鹽)水溶液以0.2m/min流過色譜柱1-2小時,,用水沖洗,然后用0.2M氫氧化鋰沖洗Li型色譜柱一天,,然后進行實驗,。
如果色譜柱沖洗后沒有改善,說明色譜柱已損壞,,需要更換新的色譜柱進行實驗,。
Question 8. 使用的Amino Na/Li型色譜柱,色譜柱怎么保存,?
如果色譜柱超過半年不使用,,建議使用以下流動相沖洗保存:使用0.2M的氫氧化鈉(氫氧化鋰)水溶液清洗色譜柱,用0.01%的辛酸的10%乙醇溶液置換色譜柱,,最后將色譜柱保存在陰暗地方,。
Question 9. Shim-pack Amino系列色譜柱有什么注意事項?
有機相比例不高于10%,,避免高溫停泵(0.1-0.3 ml/min降至室溫后再停泵),。
Question 10. Shim-pack Amino Na型和Li型色譜柱有什么區(qū)別,?
Shim-pack Amino-Na:大概可分析19個化合物,一針分析時間為90分鐘,,分析速度快,,化合物少;
Shim-pack Amino-Li:大概可分析38個化合物,,一針分析時間為180分鐘,,分析速度慢,化合物多,。
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