超速離心機(jī)的概述
　　用離心方法分離生物大分子和亞細(xì)胞物質(zhì)的基本原理是根據(jù)它們?cè)谝后w介質(zhì)中或者沉降速度不同而形成不同的區(qū)帶,，或者它們的密度不同而停留在液體介質(zhì)中不同的位置而把它們一一分開。前者是沉降速度法,，應(yīng)用該法時(shí)液體介質(zhì)的zui大密度要小于樣品中zui小顆粒的密度,，離心時(shí)選用高轉(zhuǎn)速和短時(shí)間；后者是沉降平衡法,，應(yīng)用該法時(shí)液體介質(zhì)的zui大密度要大于樣品中zui小顆粒的密度,，離心時(shí)選用較低轉(zhuǎn)速和較長(zhǎng)時(shí)間。實(shí)際操作有幾種形式：
差速離心
　　這種方法是選擇不同轉(zhuǎn)速的離心,，分別分離各個(gè)不同組分,。例如先用低速沉降大顆粒和上清液，在高速離心上清沉降中等顆粒,，zui后超速離心上清沉降小顆粒,。采用逐級(jí)提高離心力分離上情液的方法，把不同大小的顆粒分開,。
　　這種方法比較簡(jiǎn)單,，方便。分離的組份沉到管底,，因此可以迅速濃縮所要的組份,，減少體積。但回收率和純度是有矛盾的,，要提高回收率,，勢(shì)必提高轉(zhuǎn)速或延長(zhǎng)離心時(shí)間，這樣大小相近的顆粒也會(huì)沉到管底,。因此該法多用于粗提純或初步濃縮樣品,。
速度區(qū)帶（或速度梯度）離心
　　本法是將樣品放在一個(gè)連續(xù)的密度梯度液體上，通過離心,，大顆粒沉降快,，小顆粒沉降慢。經(jīng)過一段時(shí)間,，相同的顆粒就在同一深度
　　形成一條帶子,，因此把各種組份分開來(lái)。它適用于分離密度相同,、而大小不同的物質(zhì),，如不同的蛋白質(zhì)組份密度都差不多，但分子量不一樣，用本法很容易將其分開,。但對(duì)密度不同,、大小類似的物質(zhì)則不易分離。
　　蔗糖梯度是一種常用的介質(zhì),。用不同濃度的蔗糖溶液（5%-60%）配成梯度,，用于梯度離心。再分別進(jìn)行收集處于不同區(qū)帶里的各個(gè)組份,。
沉降平衡離心
　　這是靜力學(xué)的方法,。在離心管中形成一個(gè)液體梯度，在離心時(shí)各組份以不同的速度下沉,，但zui終停留在與自己相同的密度中,，形成一條狹窄的平衡帶，并保持相對(duì)的穩(wěn)定,。為了使樣品所有組份都能達(dá)到它們的平衡位置,，需要長(zhǎng)時(shí)間離心。這種方法適用于分離大小相似但密度不同的物質(zhì),，如核酸的分離,。氯化銫梯度是常用于平衡離心的介質(zhì)，分辨率很高,，可區(qū)別密度相差0.05的組分,，但離心時(shí)間需十幾到幾十小時(shí)，且價(jià)格很貴?，F(xiàn)在已有一種商品名叫"Percoll"的聚蔗糖溶液可以代替氯化銫梯度。該介質(zhì)能迅速形成梯度,，使離心時(shí)間大大縮短到1-2h而仍有很好的分離效果,。并且有配套的標(biāo)記珠（Density marker beads）可以測(cè)定樣品的密度。