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顯微圖庫 | THUNDER技術(shù)圖庫 第三彈

來源:徠卡顯微系統(tǒng)(上海)貿(mào)易有限公司   2024年09月23日 11:33  

將計(jì)算清晰度與寬場(chǎng)顯微鏡的速度,、熒光信號(hào)靈敏度和易用性相結(jié)合,,實(shí)時(shí)解碼三維生物學(xué)*。

圖片

為了幫助您回答重要的科學(xué)問題,,THUNDER技術(shù)消除了使用基于相機(jī)的熒光顯微鏡觀察厚樣品時(shí)產(chǎn)生的焦外模糊現(xiàn)象,。THUNDER技術(shù)采用了我們?nèi)碌墓怆姅?shù)字技術(shù)--Computational Clearing。因此,,可以對(duì)多種三維樣品(包括模式生物,、組織切片和三維細(xì)胞培養(yǎng)物)進(jìn)行高速、高質(zhì)量成像,。請(qǐng)看這些圖片,,了解THUNDER技術(shù)是如何幫助研究人員揭示樣品深處zui精細(xì)的結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)的。


當(dāng)您看到THUNDER技術(shù)實(shí)現(xiàn)的無霧圖像質(zhì)量后,,請(qǐng)?jiān)L問我們的產(chǎn)品頁面了解更多信息,。解THUNDER技術(shù)如何將Computational Clearing與寬場(chǎng)顯微鏡的速度、熒光信號(hào)靈敏度和易用性相結(jié)合,,從而實(shí)時(shí)解碼三維生物學(xué)*,。(*符合 ISO/IEC 2382:2015 標(biāo)準(zhǔn))



小鼠--THUNDER技術(shù)模式生物成像

圖片

在這只 E12-14 小鼠(wt 樣本)中,神經(jīng)絲被染成紅色,,以評(píng)估神經(jīng)元的生長(zhǎng)情況,。該小鼠未進(jìn)行清除。法國(guó) IGBMC 圖像中心 Yves Lutz 提供,。


類器官--THUNDER技術(shù)-模式生物成像

圖片

直徑約 150 µm 的類器官,,安裝在凹陷載玻片上。使用高分辨率物鏡(FluoCombi III)通過THUNDER技術(shù)模型生物成像,。圖片由瑞士徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Heinrich Bürgers 拍攝,。


果蠅大腦

THUNDER技術(shù)- 3D活細(xì)胞成像

果蠅大腦視頻。瑞士伯爾尼細(xì)胞生物學(xué)研究所 Rohan Chippalkatti 提供,。


蜜蜂腿 - THUNDER技術(shù)-模式生物成像

圖片

蜜蜂的腿,。圖片由德國(guó)徠卡顯微系統(tǒng)公司的 André Quinkertz 博士拍攝。


浮游動(dòng)物 - THUNDER技術(shù)

圖片

副纖毛蟲是一種單細(xì)胞纖毛微生物,,常見于池塘等死水中,。圖片由新加坡徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Adam Cliffe 拍攝。


小鼠shen臟切片 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像

小鼠shen臟切片,,含 Alexa Fluor™ 488 WGA,、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI,。樣品為美國(guó)馬薩諸塞州沃爾瑟姆市賽默飛世爾科技公司生產(chǎn)的 FluoCells™ 制備的 3 號(hào)載玻片。


小鼠shen臟切片 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像

圖片

小鼠shen臟切片,,含 Alexa Fluor™ 488 WGA,、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。樣品為美國(guó)馬薩諸塞州沃爾瑟姆市賽默飛世爾科技公司生產(chǎn)的 FluoCells™ 制備的 3 號(hào)載玻片,。


平滑肌 - THUNDER技術(shù)-模式生物成像

圖片

小鼠肺部 300 微米切片中血管周圍的平滑肌,。1x 物鏡。

德國(guó)吉森大學(xué) Mario Boehm 博士提供


原代培養(yǎng),,大鼠

THUNDER Imager 3D 細(xì)胞培養(yǎng)儀

圖片

大鼠原代細(xì)胞培養(yǎng)物,;Cy5(品紅色):β-III微管蛋白;Rhod(紅色):NG2蛋白,,GFP(綠色):Nestin蛋白,;DAPI(藍(lán)色):細(xì)胞核。圖片由美國(guó)徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Louise Bertrand 拍攝,。


鼠shen臟切片 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像

圖片

小鼠shen臟切片,,含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI,。樣品為美國(guó)馬薩諸塞州沃爾瑟姆市賽默飛世爾科技公司生產(chǎn)的 FluoCells™ 制備的 3 號(hào)載玻片,。


斑馬魚xin臟 - THUNDER技術(shù)組織成像

圖片

斑馬魚xin臟,DAPI(細(xì)胞核,,藍(lán)色),、肌球蛋白(心肌細(xì)胞,紅色)和 GFP(原始xin臟層,,綠色),。瑞士弗里堡大學(xué) Anna Jazwinska 提供。


斑馬魚胚胎 - THUNDER技術(shù)-模式生物成像

斑馬魚胚胎 6 dpf,,HPCs 穩(wěn)定表達(dá) mCherry,,VEC 穩(wěn)定表達(dá) GFP。

由中國(guó)閩南師范大學(xué)薛宇博士提供,。


C2C12 細(xì)胞


THUNDER Imager 3D活細(xì)胞和3D細(xì)胞培養(yǎng)儀

圖片

C2C12 細(xì)胞生長(zhǎng)并遷移到 transwell 膜的兩側(cè),,然后用層粘蛋白 B(品紅色)染色以顯示核結(jié)構(gòu),用 Hoechst(藍(lán)色)染色以顯示 DNA,,用 γH2AX(黃色)染色以顯示 DNA 損傷,。使用THUNDER技術(shù)3D活細(xì)胞和 63X/1.4 油浸物鏡對(duì)細(xì)胞進(jìn)行成像。上面的圖像是 17.47 微米厚 Z 疊的擴(kuò)展景深投影,。左圖為原始外熒光數(shù)據(jù),,右圖為經(jīng)過 LVCC 處理的THUNDER圖像。

圖片由美國(guó)加州大學(xué)戴維斯分校生物科學(xué)院神經(jīng)生物學(xué),、生理學(xué)和行為系 Lucas Smith 博士提供,。


病毒標(biāo)記神經(jīng)元 - THUNDER技術(shù)-模式生物成像


圖片

病毒標(biāo)記的神經(jīng)元(紅色)和星形膠質(zhì)細(xì)胞(綠色)在人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞衍生的皮質(zhì)球體內(nèi),。THUNDER技術(shù)模式生物配有 3.4 倍變焦的 2x 0.15 NA 物鏡,用于生成這張 425 µm Z 堆棧(26 個(gè)位置),,在此作為擴(kuò)展景深 (EDoF) 投影展示,。

圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Sergiu Pasca 博士實(shí)驗(yàn)室的 Fikri Birey 博士提供。


轉(zhuǎn)基因果蠅眼睛感光器

THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

image.png

轉(zhuǎn)基因果蠅的眼部感光器,,其橫紋肌上有 EGFP 標(biāo)記,受犀牛蛋白 1 啟動(dòng)子(ninaE-EGFP)控制,。

美國(guó)加利福尼亞州南舊金山基因泰克公司 Navid Nouri 提供,。


耳蝸細(xì)胞 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像

圖片

孵化后第 7 天的雞耳蝸細(xì)胞。80 微米振鏡切片,,肌球蛋白 7a - 感覺毛細(xì)胞,,Sox2 - 支持細(xì)胞。

圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Amanda Janesick 提供,。


神經(jīng)肌肉接頭 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像

圖片

通過免疫染色神經(jīng)絲蛋白和β-Bungarotoxin觀察神經(jīng)肌肉接頭,。圖片由美國(guó)加利福尼亞州的 Andrea Yung 提供。


??⑷猓‥xaiptasia pallida)

THUNDER技術(shù)模式生物

圖片

??⑷猓‥xaiptasia pallida)在THUNDER技術(shù)模式生物下的 RFP 和 GFP 熒光通道。??奈钙ぜ?xì)胞中寄生著雙鞭毛藻,,由于其葉綠素自發(fā)熒光,在 RFP 通道中可以看到這些雙鞭毛藻,。??旧碓诳谇恢車鸵恍┯|手周圍顯示綠色熒光帶。

圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Christian Renicke 提供,。


小鼠肺 - THUNDER技術(shù)組織成像

圖片

小鼠肺部,,用 FITC、Cy3,、Alexa 633 染色,,使用 20 倍物鏡和擴(kuò)展景深 (EDOF) 拍攝。

圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Ross Metzger 提供,。


顯示淀粉樣斑塊的海馬體

THUNDER Imager 3D 細(xì)胞培養(yǎng)儀

圖片

小鼠海馬的縱向腦切片,,顯示淀粉樣蛋白斑塊(綠色,用 6E10 抗體染色,,抗β淀粉樣蛋白標(biāo)記物,;藍(lán)色,DAPI(綠色,,用 6E10 抗體染色,,抗-β淀粉樣蛋白的標(biāo)記物),,周圍是小膠質(zhì)細(xì)胞/小噬細(xì)胞(紅色,用抗-Abi1 抗體染色,;藍(lán)色,,DAPI)。

左圖--原始數(shù)據(jù)與擴(kuò)展景深投影,;

右圖--大體積Computational Clearing Z 疊加擴(kuò)展景深投影,。

圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Mehrdad Shamloo 教授提供。


神經(jīng)嵴(NC)胚胎細(xì)胞群

THUNDER Imager 3D 細(xì)胞培養(yǎng)儀

圖片

上圖是使用THUNDER技術(shù) 3D 細(xì)胞培養(yǎng)器,,使用 1.3 NA 40x plan apo oil 物鏡拍攝的,。上圖為原始寬場(chǎng)數(shù)據(jù)。下圖是應(yīng)用徠卡專有的小體積Computational Clearing (SVCC) 技術(shù)去除焦外模糊并更好地顯示樣本內(nèi)部潛在結(jié)構(gòu)后的結(jié)果,。

圖片由美國(guó)加利福尼亞州帕薩迪納市加州理工學(xué)院布朗納實(shí)驗(yàn)室 Michael Piacentino 提供,。


成年小鼠卵巢

THUNDER技術(shù) 3D 細(xì)胞培養(yǎng)儀

image.png

將成年小鼠卵巢固定并用抗-NOBOX 染色,然后用改良 3DISCO 清除,。將卵巢放入一個(gè)自制的孔中,,孔底鋪上蓋玻片,然后在THUNDER 3D細(xì)胞培養(yǎng)成像系統(tǒng)上用 10X/0.32 物鏡進(jìn)行成像,。

視頻顯示了合并的 4 層馬賽克,、586µm 厚的 Z 疊的三維投影,即原始外熒光圖像和 LVCC 后的THUNDER處理圖像,。

視頻由美國(guó)加州大學(xué)舊金山分校 Diana Laird 和 Bikem Soygur 博士提供


C.elegans - THUNDER技術(shù)模式生物

圖片

該菌株MAH215(Chang等人,,Elife,2017)是一種雙熒光mCherry::GFP::LGG-1蛋白,,通過可視化自噬體(APs)以及自溶酶體(ALs)來監(jiān)測(cè)秀麗隱桿線蟲的自噬通量,。

綠色點(diǎn)狀物(GFP)是自噬體,而自噬體在酸性環(huán)境中會(huì)淬滅 GFP,,只發(fā)出 mCherry 信號(hào),。

圖片由美國(guó)賓夕法尼亞州匹茲堡大學(xué) Aditi U. Gurkar 博士提供


shen臟切片 - THUNDER技術(shù) 3D 組織成像

圖片

shen臟,用 DAPI,、WGA-FITC 和 Phalloidin-568 染色,。z=20微米。圖片由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 Kerstin Troidl 博士提供


視網(wǎng)膜切片 - THUNDER技術(shù) 3D 組織成像

圖片

視網(wǎng)膜切片,,PECAM-488,、AF-555 染色。z=30微米,。圖片由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 Kerstin Wilhelm 博士提供


xin臟切片 - THUNDER技術(shù) 3D 組織成像

圖片

xin臟切片 - THUNDER Imager 3D 組織,。用 DAPI、αSMA-FITC 和 Vimentin-Cy3 染色的xin臟切片,。z=40µm,。圖片由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 André Schneider 博士提供


ganzang切片 - THUNDER技術(shù)-3D 組織成像

圖片

用 DAPI,、SERVA、CD31-594 染色的ganzhang切片,。z=70µm,。

圖片由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 Remy Bonnavion 博士提供


腦切片 - THUNDER技術(shù)-3D 組織成像

圖片

用 DAPI、αGFAP-AF647 染色的腦切片,。z=100µm,。圖片由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 Hong Xu 博士提供


小鼠視網(wǎng)膜 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

圖片

固定小鼠視網(wǎng)膜并用以下試劑染色:抗 CD31 抗體(綠色):內(nèi)皮細(xì)胞,IsoB4(紅色):小膠質(zhì)細(xì)胞抗 GFAP 抗體(藍(lán)色):星形膠質(zhì)細(xì)胞

樣本由美國(guó)南舊金山基因泰克公司杰里米-伯頓(Jeremy Burton)博士和 Jiyeon Lee 博士提供,。成像者:Olga Davydenko 博士(徠卡公司)


小鼠主動(dòng)脈 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像

圖片

紅線--彈性層,,綠色和紅色--血管細(xì)胞,藍(lán)色--DAPI,,圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Ying Wang 提供


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紅線--彈性層,,綠色和紅色--血管細(xì)胞,,藍(lán)色--DAPI,,用 LAS X 3D Viewer 顯示。圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Ying Wang 提供


纖維 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

圖片

纖維被熒光素標(biāo)記,。目的是研究動(dòng)態(tài)和孔隙,。55 幅圖像的 Z 疊(130 微米)。圖片由美國(guó)德克薩斯州休斯頓萊斯大學(xué)生物工程系 Mollie Smoak 提供


小鼠晶狀體切片

THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

圖片

本幻燈片是小鼠成人晶狀體橫切面,,顯示纖維晶狀體細(xì)胞組織(綠色,,用抗β-catenin 抗體(BDB610153)染色,這是一種膜蛋白)和 Afadin(紅色,,用抗Afadin(PA1-25076)染色,,這是一種肌動(dòng)蛋白絲結(jié)合蛋白,藍(lán)色,,Hoechst),。

圖片由美國(guó)俄亥俄州立大學(xué) Plagemen 實(shí)驗(yàn)室 Nathalie Houssin 博士提供


人肝祖細(xì)胞 (HPC)

THUNDER技術(shù)-3D組織成像

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人肝祖細(xì)胞(HPC)在器官組織肝細(xì)胞中的擴(kuò)增和分化。使用 HC PL Fluotar 40x/0.60 物鏡拍攝的 Z 疊片總厚度為 85µm,,共 123 個(gè) Z 步,。DAPI(白色):細(xì)胞核。Alexa488™(綠色):上皮細(xì)胞粘附分子(EpCAM),。PerCP-Cy5.5(紅色):信號(hào)轉(zhuǎn)換器 CD24,。PE(藍(lán)色):原蛋白-1(CD133)。

樣本由英國(guó)諾丁漢大學(xué) E131 Andy Bennett 實(shí)驗(yàn)室 Fatima Abukunna 博士提供,。


小鼠肺 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

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為研究 I 型肺泡上皮細(xì)胞(AT1)生物學(xué)而染色的小鼠肺組織,。黃色表示 AT1 細(xì)胞系痕跡(GFP),洋紅色表示前糖化終產(chǎn)物受體(RAGE),,青色表示水腫素 5(AQP5),,灰色表示細(xì)胞核(DAPI),。圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Yana Kazadaeva 提供。


果蠅卵泡 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

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果蠅蓇葖果在THUNDER技術(shù) 3D 細(xì)胞培養(yǎng)上用 63X/1.4 油浸物鏡成像,。上面的視頻是 27.5 微米厚的 Z 疊的三維最大投影,。視頻顯示了原始外熒光數(shù)據(jù)和經(jīng)過 LVCC 處理的THUNDER技術(shù)圖像。

圖片由美國(guó)加州大學(xué)伯克利分校 Mark Khoury 和 David Bilder 提供


鹽水蝦腿 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

圖片

使用 Rhod,、GFP 和 DAPI 濾光片采集的自發(fā)熒光,。

使用 DMi8、HC PL APO 63x/1.40 Oil Objective 和 DFC9000 GT 攝像機(jī)采集圖像,。

圖像大小為 2048 x 2048 像素,,274 個(gè) Z 截面。

圖像由美國(guó)徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Louise Bertrand 拍攝,。


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