低聚半乳糖(GOS)是一種功能性低聚糖,,嬰兒體內(nèi)的雙歧桿菌菌群的建立很大程度上依賴于母乳中的GOS成分。因此,,GOS被廣泛添加到嬰幼兒食品中,,以促進(jìn)嬰兒的健康發(fā)育。根據(jù)GB 5009.289-2023,,食品中低聚半乳糖的測定方法是高效液相色譜法,。
實驗原理是:試樣中的低聚半乳糖(n為2~7)經(jīng)水溶液提取、2-氨基苯甲酰胺衍生,,用淀粉葡糖苷酶酶解去除麥芽糊精、淀粉干擾后,,用高效液相色譜-熒光檢測器檢測,。采集的色譜峰根據(jù)用相同試驗條件下液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法確定的相同聚合度的低聚半乳糖的保留時間定性,,采用相對應(yīng)聚合度和相對分子質(zhì)量的麥芽糖類聚糖標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)外標(biāo)法定量,扣除乳糖,、麥芽糖含量后,,得出低聚半乳糖含量。
實驗涉及標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置:
1.標(biāo)準(zhǔn)儲備液(10.00mg/mL):分別準(zhǔn)確稱取100mg(精確至0.1mg)的乳糖,、麥芽糖,、麥芽三糖、麥芽四糖,、麥芽五糖,、麥芽六糖、麥芽七糖標(biāo)準(zhǔn)品,,用水溶解并定容至10mL,,混勻。將各標(biāo)準(zhǔn)儲備液轉(zhuǎn)移至儲液瓶中,,于4℃保存,,保存期1個月。
2.混合標(biāo)準(zhǔn)中間液(1.000mg/mL):用Miragen電動移液器吸取各標(biāo)準(zhǔn)儲備液(10.00mg/mL)1.00mL于10mL容量瓶中,,加水定容至刻度,,混勻。臨用現(xiàn)配,。
3.混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(100.0μg/mL):用Miragen電動移液器吸取混合標(biāo)準(zhǔn)中間液(1.000mg/mL)1.00 mL于10mL容量瓶中,,加水定容至刻度,混勻,。臨用現(xiàn)配,。
4.混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作液:用10mL規(guī)格的Miragen,單吸多排模式設(shè)置設(shè)置3個體積為1.00,、2.50,、5.00 mL(程序可存儲和調(diào)用),然后按分液鍵,,將3個體積的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液(1.000mg/mL)分別加入10mL容量瓶中,,加水定容至刻度,混勻,;再用5mL規(guī)格的Miragen設(shè)置(或調(diào)用)3個體積為0.10,、1.00、5.00mL,,將3個體積的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(100.0μg/mL)分別加入10mL容量瓶中,,加水定容至刻度,混勻?;旌蠘?biāo)準(zhǔn)系列工作液的質(zhì)量濃度分別為1.000,、10.00、50.00,,100.0,、250.0μg/mL和500.0μg/mL。臨用現(xiàn)配,。
移取液體的一般是量筒和移液管,,存在三個缺點:一是敞口操作,對強(qiáng)腐蝕,、有毒有害,、揮發(fā)性的液體,存在安全隱患,;二是操作上環(huán)節(jié)多,,需目視確認(rèn)凹液面,實現(xiàn)精度難以保證,;三是效率較低,,無法滿足日益增加的液體移取的工作需求。
Miragen電動移液器,,數(shù)值靠設(shè)定或選定,,電機(jī)控制活塞運動,吸液和排液也更加穩(wěn)定,,還有步驟少,、調(diào)數(shù)快、模式多等諸多優(yōu)勢,。Miragen電動移液器可給電機(jī)多段信號,,從而達(dá)到吸液和排液分次數(shù)且各段體積可調(diào),可實現(xiàn)單吸多排,、多吸單排等效果,,程序還可存儲和調(diào)用,更加可靠,、便捷,。
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