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細(xì)胞計數(shù)板的原理和使用方法

來源:上海求精生化試劑儀器有限公司   2024年09月20日 14:18  
一,、細(xì)胞計數(shù)板的原理


細(xì)胞計數(shù)板是一種用于對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)的工具,。它通常由一塊特制的載玻片和一個蓋玻片組成,。載玻片上刻有精確的方格網(wǎng),,通過顯微鏡觀察,,可以對位于方格內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù),。


計數(shù)板的計數(shù)原理基于一定體積的細(xì)胞懸液在計數(shù)區(qū)域內(nèi)的分布情況,。計數(shù)板上的方格被設(shè)計成特定的尺寸,,使得在已知的體積范圍內(nèi),,可以通過計數(shù)方格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量來推算出細(xì)胞懸液的濃度。


二,、細(xì)胞計數(shù)板的使用方法


  1. 準(zhǔn)備工作
    • 準(zhǔn)備細(xì)胞計數(shù)板,、蓋玻片,、移液器、細(xì)胞懸液等,。

    • 確保計數(shù)板和蓋玻片清潔,、干燥,無劃痕,。

  2. 制備細(xì)胞懸液
    • 將待計數(shù)的細(xì)胞樣品制備成均勻的細(xì)胞懸液,。可以通過輕輕吹打,、攪拌或使用適當(dāng)?shù)姆稚﹣泶_保細(xì)胞均勻分散,。

  3. 加樣
    • 使用移液器吸取適量的細(xì)胞懸液,小心地滴加在計數(shù)板的計數(shù)區(qū)域上,。注意不要產(chǎn)生氣泡,,也不要讓液體溢出計數(shù)區(qū)域。

    • 通常在計數(shù)板的兩側(cè)分別滴加細(xì)胞懸液,,然后輕輕蓋上蓋玻片,,使其與計數(shù)板緊密貼合。

  4. 顯微鏡觀察
    • 將計數(shù)板放在顯微鏡的載物臺上,,使用適當(dāng)?shù)奈镧R進(jìn)行觀察,。一般使用低倍物鏡(如 10×)找到計數(shù)區(qū)域,然后切換到高倍物鏡(如 40×)進(jìn)行細(xì)胞計數(shù),。

  5. 計數(shù)細(xì)胞
    • 計數(shù)板上通常有兩種類型的方格:大方格和小方格,。大方格又被分為多個小方格。

    • 計數(shù)時,,只計數(shù)位于大方格四個角和中央的中方格內(nèi)的細(xì)胞,。對于壓線的細(xì)胞,只計數(shù)上側(cè)和左側(cè)線的細(xì)胞,,避免重復(fù)計數(shù),。

    • 分別計數(shù)不同區(qū)域的細(xì)胞,取平均值以提高計數(shù)的準(zhǔn)確性,。

  6. 計算細(xì)胞濃度
    • 根據(jù)計數(shù)板的規(guī)格和計數(shù)的細(xì)胞數(shù)量,,可以計算出細(xì)胞懸液的濃度。

    • 例如,,如果計數(shù)板上一個大方格的體積為 0.1mm3,,計數(shù)了 5 個大方格內(nèi)的細(xì)胞總數(shù)為 N,則細(xì)胞濃度(個 /mL)=N×10?,。

  7. 清洗和保存
    • 計數(shù)完畢后,,及時清洗計數(shù)板和蓋玻片,避免細(xì)胞殘留影響下次使用,。

    • 將計數(shù)板和蓋玻片干燥后,,存放在清潔,、干燥的地方。


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