液相色譜在藥物分析/生物制藥分析的應用

《液相色譜在藥物分析/生物制藥分析的應用》由南京科捷分析儀器有限公司提供,！

例一,、磺胺分析

樣  品：磺胺、磺胺嘧啶,、磺胺甲基異噁唑和甲氧芐氨嘧啶的混合物

色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀,，740色譜數(shù)據(jù)處理機

檢測器：UV 481型紫外檢測器，波長240nm

色譜柱：μ-Bondapak C₁₈ , 5μm,，柱長25 cm,，柱徑4.6 mm

流動相：由KH₂PO₄（0.05mol/L）和Na₂HPO₄（0.05 mol/L）以及MeOH所組成，其用量比例為200:10:165,，

流  速：1mL/min

進  樣：10μL

結(jié)  果：所有組分在6min之內(nèi)全部流出,，各組分*分離，組分出峰順序為：磺胺保留時間為2.60 min, 磺胺嘧啶保留時間為3.18 min,、磺胺甲基異噁唑保留時間為4.33 min,甲氧芐氨嘧啶保留時間為5.19min,。

例二、銀杏內(nèi)酯分析

樣  品：含銀杏苦內(nèi)酯等4種物質(zhì)的混合物

色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀

        配有570自動進樣器,，Rheadyane 77251進樣閥,，HP化學工作站

檢測器：500型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測器

漂移管溫度為91℃，氮氣流速為2.75L/min

色譜柱：Platinum OPS,，5μm,，柱長25cm，柱徑4.6mm

流動相：水:甲醇:四氫呋喃 = 75:20:10

流  速：1mL/min

進  樣：10μL

結(jié)  果：所有組分在15min之內(nèi)全部流出,，各組分*分離,，組分流出順序為：峰1為銀杏苦內(nèi)酯C, 峰2為白果內(nèi)酯, 峰3銀杏苦內(nèi)酯A, 峰4為銀杏苦內(nèi)酯B。

例三,、脂肪酸甲酯分析

樣  品：含5種脂肪酸甲酯的混合物

色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀,，配有色譜工作站

檢測器：500型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測器

漂移管溫度為45℃，氮氣流速為1.5L/min

色譜柱：Silver Impregnated Ion-Exchange ,柱長25cm,，柱徑4.6mm

流動相：乙腈:甲醇 = 2:98

流  速：0.75mL/min

進  樣：10μL

結(jié)  果：所有組分在10min之內(nèi)全部流出,，各組分*分離，組分流出順序為：峰1為C_18：0脂肪酸甲酯,，峰為C_18：1脂肪酸甲酯,，峰3為C_18：2脂肪酸甲酯，峰4為C_18：3脂肪酸甲酯,，峰1為C_20：4脂肪酸甲酯,。

例四、嘌呤分析

樣  品：取1mL血漿加入200μL的1.98mol/L的高氯酸（GR）,，再加入600μL蒸餾水和200μL的1.47mol/L的別嘌呤醇（內(nèi)標）,，用旋轉(zhuǎn)混合器振搖10s于1200g離心10min，取上層清液備分析用,。

色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀,，配有色譜工作站

檢測器：UV紫外檢測器，254nm

色譜柱：μBondapsk C₁₈ ,，10μm,，柱長30cm，柱徑3.9mm

流動相：0.02mol/L的磷酸二氫鉀,，pH = 2.2

流  速：2.0mL/min

進  樣：10μL

結(jié)  果：所有組分在12min之內(nèi)全部流出,，各組分分離*，保留時間依次為：尿嘌呤為3.18min（峰1）,，腺嘌呤為3.21 min（峰2）,，次黃嘌呤為3.90 min（峰3）,，5-羥基吡嗪酸為4.75min（峰4）,，5-羥基吡嗪胺為5.31 min（峰5），黃嘌呤為5.90 min（峰6）,，吡嗪酸為7.35min（峰7）,，內(nèi)標別嘌呤醇為8.53min（峰8）,，吡嗪胺為9.57min（峰9）,。

例五,、抗菌素分析

樣  品：含有紅霉素等5種抗菌素的混合物

色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀

        配有570自動進樣器,，Rheadyane 77251進樣閥,，HP化學工作站

檢測器：2000型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測器

漂移管溫度為95℃，氮氣流速為2.0L/min

色譜柱：Alltima^TM C₁₈ ,5μm,，柱長15cm，柱徑4.6mm

流動相：A為0.2% 五氟丙酸, B為甲醇

梯  度：時間      0min        5min   

        A/B     55%/45%     35%/65%        

流  速：1mL/ min

進  樣：10μL

結(jié)  果：所有組分在6min之內(nèi)全部流出,，各組分*分離,，組分流出順序為：峰1為紅霉素,，峰2為鏈霉素，峰3為托布霉素,，峰4為阿米卡星,，峰5為新霉素,。

例六,、無活菌素分析

樣  品：含無活菌素等5種物質(zhì)的混合物

色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀

        配有570自動進樣器,，Rheadyane 77251進樣閥，HP化學工作站

檢測器：2000型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測器

漂移管溫度為96℃,，氮氣流速為2.9L/min

色譜柱：Alltima^TM C₁₈ ,5μm,，柱長25cm，柱徑4.6mm

流動相：THF:水 = 60:40

流  速：1mL/min

進  樣：20μL

結(jié)  果：所有組分在20min之內(nèi)全部流出,，各組分*分離,，組分流出順序為：峰1為無活菌素，峰2為單活菌素,，峰3為二活菌素,，峰4為三活菌素，峰5為四活菌素,。

例七,、植物甾醇分析

樣  品：含β-谷甾醇,、豆甾醇、菜油甾醇,、菜籽甾醇和膽固醇的混合物

色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀,，配有色譜工作站

檢測器：Alltech 2000型  ELSD蒸發(fā)光散射檢測器

        漂移管溫度為70℃，氮氣流速1.6L/min

色譜柱：Supecol Discouery C₁₈ , 5μm，柱長25cm ,，柱徑4.6mm

流動相：甲醇

流  速：1mL/min

進  樣：10μL

結(jié)  果：所有組分在19min之內(nèi)全部流出,，各組分*分離,，組分流出順序為：峰1為菜籽甾醇保留時間13.70min,，峰2為膽固醇保留時間14.62 min，峰3為豆甾醇保留時間15.45min,，峰4為菜油甾醇保留時間15.97min,，峰5為β-谷甾醇保留時間17.05min,。