生化試劑試驗步驟

來源：上海佰利萊生物科技有限公司 2024年09月04日 12:20

生化試劑試驗步驟有哪些：

1、貼壁細胞用yí酶消化,，離心收集,。

2、細胞重懸于冰冷的PBS漂洗一次,，離心收集,。試驗步驟2再重新作一邊。

3,、加入5mlDNA提取緩沖液,，（10mmol/LTris-cl,0.1mol/LEDTA,o.5%SDS）,混勻。

4、加入25ul蛋白酶K,使終濃度達到100ug/ml,混勻,，50℃水浴3h,

5,、用等體積的酚抽提一次，2500rpm離心收集水相,，用等體積的（酚,，異戊醇）混合物抽提一次，2500r/min離心收集水相

6,、用等體積的,，異戊醇抽提一次。加入等體積的5mol/L的LiCL,混勻,，冰浴,，10min.。

7,、2500rpm離心10min.轉(zhuǎn)上清于一離心管中,。加入等體積的異丙醇。室溫10min,。2500rpm,離心10min,。棄上清。

8,、加入0.1倍體積3mol/L乙酸鈉（PH5.2）與2倍體積-20℃預(yù)冷無水乙醇。-20℃20min,。

9,、12000r/min,室溫離心5min。棄上清,。將DNA溶于適量TE中,。

（以上實驗步驟可供各位老師參考.）

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