造血干細(xì)胞培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件及方法

來源：紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司 2024年09月04日 11:28

造血干細(xì)胞（HematopoieticStemCells,HSCs）的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件對(duì)其增殖和分化至關(guān)重要,。以下是有關(guān)造血干細(xì)胞培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件及方法的一些關(guān)鍵點(diǎn)：

1.培養(yǎng)基組成

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括RPMI-1640、DMEM/F-12或StemPro®-34等,。這些培養(yǎng)基提供了細(xì)胞生長所需的基本營養(yǎng)物質(zhì),。

補(bǔ)充劑：

胎牛血清（FBS）：通常使用10%胎牛血清,，提供生長因子和營養(yǎng)物質(zhì)。

造血生長因子：包括促紅細(xì)胞生成素（EPO）,、粒細(xì)胞刺激因子（G-CSF）,、巨核細(xì)胞刺激因子（M-CSF）和其他相關(guān)的細(xì)胞因子。

抗生素：如青霉素-鏈霉素混合液,，防止培養(yǎng)中細(xì)菌或真菌污染,。

其他添加劑：如L-谷氨酰胺、β-巰基乙醇等,，以支持細(xì)胞的健康和功能,。

2.培養(yǎng)條件

溫度：一般培養(yǎng)溫度為37°C，以模擬體內(nèi)環(huán)境,。

CO?濃度：通常設(shè)置在5%的CO?濃度下,，以維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定。

濕度：培養(yǎng)箱內(nèi)需要保持適當(dāng)?shù)臐穸?，以防止培養(yǎng)基蒸發(fā),。

3.培養(yǎng)方法

細(xì)胞接種：

細(xì)胞接種密度通常需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體要求來調(diào)整，一般接種密度在1-5×10^5cells/mL之間,。

換液：

定期更換培養(yǎng)基,，通常每2-3天一次，以去除代謝廢物和補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì),。

細(xì)胞監(jiān)測(cè)：

定期觀察細(xì)胞生長情況,，使用顯微鏡檢查細(xì)胞的形態(tài)和生長狀態(tài)。

細(xì)胞傳代：

當(dāng)細(xì)胞達(dá)到80%-90%的融合度時(shí),，需要進(jìn)行傳代,，以避免過度擁擠影響細(xì)胞健康。

凍存與復(fù)蘇：

凍存：使用含有冷凍保護(hù)劑（如DMSO）的培養(yǎng)基將細(xì)胞凍存于-80°C或液氮中,。

復(fù)蘇：將凍存的細(xì)胞在37°C水浴中迅速解凍后,，立即轉(zhuǎn)移至含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中恢復(fù)生長。

4.實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

無菌操作：所有操作需在無菌條件下進(jìn)行,，以防止污染,。

培養(yǎng)基配制：確保培養(yǎng)基配制和儲(chǔ)存過程中的無菌和穩(wěn)定性。

細(xì)胞檢測(cè)：定期檢測(cè)細(xì)胞的健康狀況,，如細(xì)胞計(jì)數(shù),、活性測(cè)試等,，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

這些條件和方法有助于保持造血干細(xì)胞的生物學(xué)特性和功能,，支持其在體外的增殖和研究,。

相關(guān)產(chǎn)品

凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載,、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任,。
本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息,，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體,、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
如涉及作品內(nèi)容,、版權(quán)等問題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利,。

聯(lián)系我們