培養(yǎng)基的組成成分:
盡管不同的細(xì)菌對營養(yǎng)的要求不同,,但細(xì)菌需要的營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)含有水,、氮源,、碳源、無機鹽類和生長因子等,,常用的營養(yǎng)物質(zhì)如下:
1.蛋白胨:蛋白胨是制備培養(yǎng)基時zui常用的成分之一,,提供細(xì)菌生長繁殖所需要的氮源。是動物或植物蛋白質(zhì)經(jīng)酶或酸堿分解而成,。植物胨和動物胨各有優(yōu)點,,配制培養(yǎng)基常將兩者按一定比例混合使用,提高培養(yǎng)基的營養(yǎng)價值,。蛋白胨易溶于水,,遇酸不沉淀,不因受高溫而凝固,,并為兩性電解質(zhì)有緩沖作用,。但吸水性強,應(yīng)注意干燥密封保存,。
2.肉浸液:是用新鮮牛肉浸泡,、煮沸而制成的肉汁。其中含有可溶性含氮浸出物(肌酸,、黃嘌呤,、腺嘌呤、次黃嘌呤核苷酸,、谷氨酸,、甘氨酸等)和非含氮浸出物(肝糖、乳酸,、琥珀酸,、磷酸己糖、脂肪,、無機鹽類等),。還有一些生長因子。肉浸液可為細(xì)菌提供氮源和碳源,,但肉浸液中所含氮物質(zhì)過少而不能滿足細(xì)菌的需要,,因此在制備培養(yǎng)基時應(yīng)再加入l%~2%的蛋白胨和0.5%氯化鈉。
3.牛肉膏:由肉浸液經(jīng)長時間加熱濃縮而制成。糖類在加熱過程中被破壞,,所以其營養(yǎng)價值低于肉浸液,,但因無糖可用作腸道桿菌鑒別培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。由于使用方便,,常用于制備培養(yǎng)基。
4.糖類,、醇類:為細(xì)菌生長提供碳源和能源,。制備培養(yǎng)基所用的糖類、醇類有多種,,常用的糖類有單糖(葡萄糖,、阿拉伯糖等)、雙糖(乳糖,、蔗糖等)和多糖(淀粉,、菊糖等);常用的醇類有甘露醇,、衛(wèi)茅醇等,。除葡萄糖、蔗糖主要作為碳源和能源的基本成分外,,其他糖類和醇類主要用于鑒定細(xì)菌所做的發(fā)酵反應(yīng),。
5.血液:血液中既含有蛋白質(zhì)、多種氨基酸,、糖類,、無機鹽類等營養(yǎng)物質(zhì),又能提供輔酶(如V因子),、血紅素(X因子)等特殊生長因子,,所以培養(yǎng)基中加入血液用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌。另外,,還可根據(jù)細(xì)菌在血液培養(yǎng)基中的溶血現(xiàn)象而進行鑒定,。
6.無機鹽類:提供細(xì)菌生長的各種元素,如:鉀,、鈉,、鐵、鎂,、鈣,、磷、硫等,。用于制備培養(yǎng)基的無機鹽類有多種,,其中zui常用的有氯化鈉和磷酸鹽,前者對維持酶的活性、調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外的滲透壓非常重要,,后者是細(xì)菌良好的磷源,,并在培養(yǎng)基中具有緩沖作用。
7.雞蛋和動物血清:雖然不是構(gòu)成培養(yǎng)基的基本成分,,但卻是某些細(xì)菌生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì),,所以僅用于制備一些特殊的培養(yǎng)基,這些細(xì)菌直接從雞蛋和動物血清中獲取營養(yǎng),。如培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌的雞蛋培養(yǎng)基和培養(yǎng)白喉桿菌的呂氏血清培養(yǎng)基等,。
8.生長因子:是細(xì)菌生長所必需的,但需要量很小,。在制備培養(yǎng)基時,,常在肝浸液、肉浸液,、酵母浸液和含血液培養(yǎng)基中加入維生素,、氨基酸、嘌呤,、嘧啶等生長因子,。
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