凱杰qiagen質(zhì)粒提取試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
一,、凱杰Qiagen介紹
QIAGEN是一家專業(yè)化致力于生物分子樣品制備解決方案的跨國經(jīng)營企業(yè),,總部位于德國,。1984年,,QIAGEN在德國成立,,1996年在美國紐約納斯達(dá)克上市,。QIAGEN擁有超過1000項(xiàng)zhuanli和認(rèn)可證明,,在18個國家設(shè)立了分公司,,代理商服務(wù)國超過40個,,在全球有超過400000的用戶。QIAGEN提供的產(chǎn)品超過500類,,包括各種試劑,,耗材和自動化純化工作站。這些產(chǎn)品用于樣品采集,,穩(wěn)定,,核酸或蛋白的分離,,純化和檢測中,不僅廣泛的應(yīng)用于科研領(lǐng)域的各個方面,,在生物技術(shù),,制藥,法醫(yī)研究,,食品安全檢測,,畜牧業(yè)和分子診斷領(lǐng)域也得到了廣泛的應(yīng)用。QIAGEN產(chǎn)品的zuo越品質(zhì)和在應(yīng)用中的出色表現(xiàn)使得其成為樣品處理中標(biāo)準(zhǔn)的代名詞,。
二,、凱杰qiagen質(zhì)粒提取試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
?Qiagen質(zhì)粒提取試?劑盒的實(shí)驗(yàn)原理?主要基于細(xì)菌的培養(yǎng)、收獲和裂解,,以及隨后通過特定的緩沖液和操作步驟來純化質(zhì)粒DNA,。這個過程涉及幾個關(guān)鍵步驟,包括細(xì)菌的培養(yǎng),、收獲,、裂解,以及質(zhì)粒DNA的純化,。
1. ?細(xì)菌的培養(yǎng)?:首先,,從瓊脂平板上挑取一個單菌落,接種到含有適當(dāng)抗生素的LB液體培養(yǎng)基中,,并在特定條件下培養(yǎng),,以便質(zhì)粒DNA能夠自主復(fù)制。
2. ?細(xì)菌的收獲和裂解?:通過離心收集細(xì)菌,,然后使用特定的緩沖液(如Buffer P1)重懸細(xì)菌,。接著添加Buffer P2并劇烈晃動以裂解細(xì)菌,這一步中SDS(十二烷基硫酸鈉)起到變性蛋白質(zhì)的作用,,促進(jìn)細(xì)胞壁的裂解,。隨后加入冰浴的Buffer P3,通過離心和過濾步驟去除細(xì)胞碎片和未裂解的細(xì)胞,。
3. ?質(zhì)粒DNA的純化?:經(jīng)過上述步驟后,,質(zhì)粒DNA被釋放到溶液中。通過使用QIAGEN-tip柱進(jìn)行進(jìn)一步的純化,,利用特定的緩沖液(如Buffer QBT,、Buffer QC和Buffer QN)進(jìn)行洗滌和洗脫,最終得到較為純凈的質(zhì)粒DNA,。
這個過程的關(guān)鍵在于使用特定的緩沖液和操作步驟來最大限度地提取質(zhì)粒DNA,,同時(shí)去除雜質(zhì),如蛋白質(zhì)和基因組DNA,,以確保獲得高質(zhì)量的質(zhì)粒產(chǎn)品,。此外,,通過加入異丙醇和乙醇進(jìn)行沉淀和清洗,進(jìn)一步提高了質(zhì)粒DNA的純度和濃度,。
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三,、凱杰qiagen質(zhì)粒提取試劑盒目錄表
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
12362 | EndoFree Plasmid Maxi Kit (10) | 10T |
12381 | EndoFree Plasmid Mega Kit (5) | 5T |
12391 | EndoFree Plasmid Giga Kit (5) | 5T |
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