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DNS 試劑(NY/T 法)操作說明

來源:上海信帆生物科技有限公司   2024年08月15日 12:03  

DNS 試劑(NY/T 法)操作說明


產(chǎn)品簡介:

植物體內(nèi)的碳素營養(yǎng)狀況以及農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)形狀,,常以糖含量作為重要指標(biāo),,單糖和某些寡糖(如麥芽糖)含有游離的醛基或酮基,,具有還原性,屬于還原糖,;多糖和蔗糖等屬于非還原糖,,可以利用多糖能被酸水解為單糖的特性,通過測定水解后的單糖含量對(duì)總糖進(jìn)行測定,。

DNS試劑(NY/T法)由氫氧化鈉,、3,5-二硝基水楊酸、酒石酸鉀鈉,、酚等配制而成,,DNS濃度為6.3g/L,是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分之一,,其檢測原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸,,3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物,在一定范圍內(nèi)還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系,,在540nm處測定棕紅色物質(zhì)的吸光度,,該吸光度值與還原糖含量呈線性關(guān)系,利用比色法和標(biāo)準(zhǔn)曲線測得樣品中的還原糖和總糖的含量,。DNS試劑也常用淀粉酶,、纖維素酶、木聚糖酶等的活性測定,。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,,不適用于臨床診斷或其他用途。 


產(chǎn)品名稱:DNS試劑(NY/T法)

產(chǎn)品貨號(hào):XF0284

規(guī)格:100ml

儲(chǔ)存條件:室溫,,避光

有效期:12個(gè)月

用途:農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)法DNS試劑,。又稱3,5-二硝基水楊酸法或簡稱DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分之一,定量檢測植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量。3,5-二硝基水楊酸濃度為6.3g/L,。


自備材料:

1,、蒸餾水、鹽酸溶液,、氫氧化鈉溶液

2,、剪刀、勻漿器或研缽,、50ml 離心管,、離心機(jī)、水浴鍋或恒溫箱,、分光光度計(jì),、比色皿


操作步驟(僅供參考):

1、還原糖的提?。?/p>

①稱取植物樣品 0.5~3g,,剪碎,,加入蒸餾水約 3ml 勻漿,轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,,用12ml 蒸餾水沖洗研磨器 2~3 次,,洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。

②50℃水浴 30min,,并不時(shí)攪拌,,以便還原糖徹-底浸出。

③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至 50ml 離心管,,4000g 離心,。

④留取上清液,向沉淀中加入 20ml 蒸餾水,,混勻,,再次 4000g 離心。

⑤留取上清液,,將 2 次獲得的上清液合并,,用蒸餾水定容至 100ml(提取液),混勻,,作為還原糖待測液,。

2、總糖的水解和提?。?/p>

①稱取植物樣品 0.5~3g,,剪碎,加入蒸餾水約 3ml 勻漿,,轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,,用12ml 蒸餾水沖洗研磨器 2~3 次,洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器,。

②向容器中加入 10ml 6M 鹽酸溶液,,攪拌均勻,煮沸,,并不時(shí)攪拌,。

③取 2 滴滴加于載玻片上,滴加 1 滴顯色液,,檢查水解是否完-全,,如已經(jīng)水解完-全則不顯示藍(lán)色。

④水解完畢后,,冷卻至室溫,,加入 6M 氫氧化鈉溶液,使溶液 pH 至7.4 左右,,用蒸餾水定容至 100ml,,混勻,,4000g 離心或過濾,,獲得上清或?yàn)V液,。

⑤取上清或?yàn)V液 10ml,用蒸餾水定容至 100ml,,成稀釋 10 倍的總糖水解液(提取液),,取 1ml 總糖水解液,測定其還原糖的含量,。

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