高效液相色譜法中,，常用的試劑主要是有機(jī)溶劑、各種鹽類(lèi)及水,。有機(jī)溶劑一般多為購(gòu)買(mǎi)的色譜級(jí),，所以出現(xiàn)問(wèn)題的幾率較小。但是分裝出的有機(jī)溶劑,，由于多次使用,，被污染的概率較大,，因此引入干擾峰的幾率較高。其次是水,，水中的雜質(zhì)是干擾峰的主要來(lái)源之一,，這是大家極易忽視的問(wèn)題。采集波長(zhǎng)較低的檢測(cè)方法,，建議使用高品質(zhì)水,，這樣可以避免很多因?yàn)樗|(zhì)帶來(lái)的問(wèn)題。再次是各種鹽類(lèi),，這也是色譜干擾峰的主要來(lái)源之一,。如圖2所示，與圖1相比,，如圖2加入磷酸二氫鉀后,，16.5min處出現(xiàn)干擾峰。對(duì)于無(wú)機(jī)鹽引入的干擾峰,，在方法開(kāi)發(fā)初期一般就會(huì)給眼關(guān)注,，尋找解決方案。方法確定后,，鹽的品種及級(jí)別也同時(shí)確定,，因此鹽對(duì)方法的影響基本可控。水和無(wú)機(jī)鹽引起的干擾峰,，比較快捷的解決方案是安裝鬼峰補(bǔ)集柱,，這樣可以有效的避免此類(lèi)干擾。如果使用離子對(duì)試劑,，則需選擇不影響離子對(duì)試劑的鬼峰補(bǔ)集柱,。
干擾峰來(lái)源的第二個(gè)方面是流動(dòng)相配制及樣品前處理過(guò)程中接觸的各種器材,。首先是流動(dòng)相配制過(guò)程中接觸的器材,，包括燒杯、玻璃棒,、pH計(jì),、濾杯、濾膜,、流動(dòng)相瓶等,。燒杯、玻璃棒是配制流動(dòng)相首先接觸的器材,，因此建議配制流動(dòng)相的燒杯,、玻璃棒專(zhuān)用。濾杯實(shí)驗(yàn)人員只要清洗干凈一般不會(huì)帶來(lái)污染。需要注意的是,，如果過(guò)濾含有離子對(duì)的流動(dòng)相,，建議增加清洗次數(shù)，避免清洗不干凈污染后續(xù)流動(dòng)相,。因此,，對(duì)濾杯的清洗應(yīng)該建立基本的洗滌規(guī)程，保證實(shí)驗(yàn)人員對(duì)使用的器材清洗到位,。濾膜也是干擾峰引入源頭之一,。如圖3所示，乙腈經(jīng)過(guò)有機(jī)系濾膜過(guò)濾后,，在梯度洗脫中會(huì)引入較大干擾峰,。鑒于色譜級(jí)試劑廠家已經(jīng)過(guò)膜，且多數(shù)儀器都有脫氣機(jī),，所以筆者建議無(wú)需再對(duì)甲醇,、乙腈等純有機(jī)相過(guò)濾。流動(dòng)相瓶引入干擾峰的現(xiàn)象主要出現(xiàn)在夏季,，這是由于夏季溫度高，純水相容易滋生細(xì)菌,。后續(xù)的流動(dòng)相瓶使用人員清洗不到位,，所以導(dǎo)致引入干擾峰。因此流動(dòng)相瓶的清洗要建立嚴(yán)格的洗滌規(guī)程,。再次樣品前處理過(guò)程中接觸的器材,。前處理過(guò)程中接觸的器材主要包括容量瓶、濾頭,、注射器及進(jìn)樣瓶,。容量瓶的清洗同流動(dòng)相瓶、過(guò)濾裝置一樣,，要建立良好的清洗規(guī)程,。移液器材以及濾頭、注射器,，多為塑料制品,，其化學(xué)惰性較玻璃制品差，因此容易引入干擾峰,。如下圖4,、圖5、圖6所示案例,，此方法檢測(cè)波長(zhǎng)為210納米,，溶劑為正己烷-異丙醇（90:10），溶劑分別接觸移液槍槍頭、一次性吸管,、一次性注射器后,，均引入不同的干擾峰。
進(jìn)樣小瓶若為一次性使用,，一般不會(huì)引入干擾峰,。如果進(jìn)樣瓶反復(fù)清洗，多次使用,，則應(yīng)建立清洗規(guī)程并對(duì)其清洗干凈程度進(jìn)行確認(rèn)
與前兩類(lèi)干擾峰相比，液相系統(tǒng)干擾峰的解決更加困難,。液相系統(tǒng)是一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程,，所以此類(lèi)問(wèn)題解決過(guò)程耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，而且要求實(shí)驗(yàn)人員有很高的色譜素養(yǎng),。對(duì)此類(lèi)問(wèn)題來(lái)源主要?dú)w結(jié)為三類(lèi)：強(qiáng)保留物質(zhì),、離子對(duì)污染和管路滋生細(xì)菌。首先是強(qiáng)保留物質(zhì)的干擾,，其主要特征是寬峰,。此類(lèi)問(wèn)題多數(shù)發(fā)生在等度洗脫中，梯度洗脫主要出現(xiàn)在高比例有機(jī)相處,。這是由于強(qiáng)保留物質(zhì)在當(dāng)次進(jìn)樣中未洗脫出,，在后續(xù)進(jìn)樣洗脫出來(lái)所致。如圖7中9分鐘處的色譜峰,。
對(duì)于此類(lèi)干擾峰,，可通過(guò)延長(zhǎng)采集時(shí)間或增加洗脫強(qiáng)度來(lái)消除對(duì)后續(xù)樣品的干擾。
系統(tǒng)干擾峰第二個(gè)方面是離子對(duì),、螯合劑這種難以洗脫的試劑對(duì)液相系統(tǒng)的污染,。此類(lèi)污染物多半是由于使用完畢含有離子對(duì)、螯合劑之類(lèi)的流動(dòng)相后,，對(duì)系統(tǒng)的沖洗不干凈所致,。此類(lèi)污染物主要對(duì)一些采集波長(zhǎng)較低的方法產(chǎn)生干擾，普遍表現(xiàn)是基線噪音大或者干擾峰,，但隨著方法的運(yùn)行會(huì)逐漸趨于正常,。系統(tǒng)干擾峰第三個(gè)方面是系統(tǒng)滋生細(xì)菌。對(duì)于系統(tǒng)滋生細(xì)菌,，多數(shù)讀者可能覺(jué)得不可思議,，因?yàn)橐合嘞到y(tǒng)使用完畢都會(huì)用有機(jī)相沖洗保存。目前很多方法流動(dòng)相A都是水相,，雖然水相每日都會(huì)新配制,，但如果由濾頭到比例閥這一段管路長(zhǎng)時(shí)間在水相中就會(huì)滋生細(xì)菌。隨著時(shí)間的運(yùn)行，梯度洗脫中會(huì)逐漸的產(chǎn)生干擾峰,。此類(lèi)問(wèn)題雖然比較隱蔽,，但比較容易解決，只要每日對(duì)放置純水相的通道用有機(jī)相沖洗即可避免此類(lèi)問(wèn)題,。實(shí)際工作中,，色譜工作者遇到的最大困難是如何識(shí)別判斷干擾峰屬于哪一類(lèi)。由于找不清問(wèn)題根源,，所以也就難以有針對(duì)性的解決問(wèn)題,。
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