Octet® 非標記分子互作分析系統(tǒng)采用實時的非標記分析技術(shù),，用于測定親和力,、動力學和抗體/蛋白質(zhì)定量,。這種無流路的儀器平臺基于生物層干涉（BLI）技術(shù)而設計，與傳統(tǒng)的非標記技術(shù)相比，具有眾多優(yōu)勢。

2024年上半年（截至6月30日在線發(fā)表）的國內(nèi)論文中，使用賽多利斯Octet® 數(shù)據(jù)的國內(nèi)論文呈現(xiàn)井噴狀態(tài),。陳老師統(tǒng)計了2024年上半年約200篇國內(nèi)論文（預計總數(shù)超過200篇），這些文章分布于130個單位,， 詳細列表在文末哦~老規(guī)矩,，讓我們先按照單位和應用進行統(tǒng)計。

圖1. 2024上半年Octet® 文章第一作者單位分布

圖2. 2024H1 Octet® 文章應用分布

今天,，我們就來挑選幾篇代表性文章來一一解讀：

全球氣候變化伴隨著二氧化碳（CO₂）富集和高溫（HT）脅迫,。研究發(fā)現(xiàn)，番茄外源質(zhì)外糖 （Glc）處理增強了番茄在環(huán)境CO₂條件下對HT脅迫的恢復力,?；诩毎纳飳痈缮娣ǎ∣ctet® ）,、亞細胞定位和分裂熒光素酶測定表明，Glc 與番茄 G 蛋白信號轉(zhuǎn)導 1 （RGS1） 調(diào)節(jié)因子結(jié)合并誘導 RGS1 內(nèi)吞作用,，從而以濃度依賴性方式誘導 RGS1-G 蛋白α亞基 （GPA1） 解離,，這是 CO₂-Glc 誘導的耐熱性升高所必需的。這些信息增強了對Glc-G蛋白信號傳導功能在應對全球氣候變化的脅迫恢復力中的理解,，并將有助于開發(fā)植物恢復力的基因工程方法,。

圖3. 將原生質(zhì)體固化在Octet® 傳感器上，結(jié)合各種單糖,，發(fā)現(xiàn)表達RGS1的細胞主要結(jié)合葡萄糖,，但是將RGS1突變后，與葡萄糖結(jié)合變?nèi)?/p>

Octet® 因為浸入即讀的方法,，更適合檢測比較大的分析物,，比較細胞。

第三劑滅活新型冠狀病毒疫苗的抗體反應對疫苗的保護作用至關(guān)重要,。西湖大學工學院對接種疫苗的15人的九個月里七個時間點進行了微量取樣和靜脈穿刺取樣,，并建立了基于Octet® 的光纖生物層干涉法測量(FO-BLI)來測試血清中的中和抗體，可以在幾分鐘內(nèi)完成測試,。研究結(jié)果揭示發(fā)現(xiàn)在第三次給藥后,，野生型變體的血清NAb水平在7天后增加了2.9倍，在一個月內(nèi)增加了3.3倍,，隨后下降,，并在三個月后變得不可檢測。針對原始株與變異株的中和能力檢測, FO-BLI與假病毒中和試驗高度相關(guān)(Pearson 相關(guān)系數(shù)為0.983),?；贔O-BLI的濃度測試因為其快速，并且與功能性匹配,，有潛力在疾病預防和疫苗開發(fā)中有著更大的應用,。

圖4. A圖：Octet® 建立血清中和抗體的檢測方法，將受體ACE2結(jié)合在傳感器上,，與HRP偶聯(lián)的不同病毒株的RBD和血清的混合物孵育,，然后用底物放大信號；B圖：這種方法測試的標準抗體的靈敏度可以達到20ng/mL,；

D圖：FO-BLI的檢測結(jié)果與病毒中和實驗PVNT（IC50）有良好的相關(guān)性

使用生物層干涉技術(shù),，可以快速建立濃度檢測方法。

研究者建立了一種基于Octet® 的垂釣技術(shù),，研究人員將GNAS蛋白固化至SA傳感器表面,，再與中藥參芪降糖顆粒（SJG）提取物結(jié)合，隨后提取物被解離至洗脫液中，將洗脫液使用UHPLC-Q/TOF-MS/MS分析GNAS垂釣出的小分子,。通過垂釣組與對照組的相對含量變化篩選26個小分子可能與GNAS有相互作用,。其中7個化合物用Octet® 進一步驗證，并顯示出強的結(jié)合活性,，均是SJG的主要成分,。其中，黃芪中的Formononetin,、高麗參的三七皂苷Ft1和人參皂苷中的甲素人參F2為“君“,、地黃中的Catapol為“臣”，五味子中的五味子素A和茜草中的沒食子酸為“佐使”,，符合中醫(yī)配伍“君臣佐使“原則,。

圖5. Octet® 驗證小分子和GNAS的結(jié)合

非流路設計可以多次垂釣富集豐度低結(jié)合弱的小分子，提高垂釣的成功率,。

肝細胞對預防非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）和其他慢性代謝性疾病具有重要意義。中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所黃波團隊研究發(fā)現(xiàn),，糖原合成使用其中間代謝物尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）來拮抗脂肪生成,，從而引導小鼠和人肝細胞將葡萄糖碳儲存為糖原。在這項機制研究中,，發(fā)現(xiàn)UDPG通過SLC35F5轉(zhuǎn)運進入高爾基體后,，誘導site-1蛋白酶S1P的泛素化降解，從而阻斷活性形式SREBP1c的生成,，最終抑制脂肪酸的合成,。通過Octet® 非標記分子互作系統(tǒng)對小鼠和人的脂肪酸合成過程中關(guān)鍵酶（S1P）與UDPG結(jié)合這一重要步驟進行了驗證，并提供了結(jié)合的直觀證據(jù),。

圖6. 通過SA傳感器固化小鼠（a）和人（b）的S1P蛋白分別與不同濃度UDPG結(jié)合解離曲線

原文大量pulldown以及CO-IP數(shù)據(jù),，但作者仍選擇用Octet® 非標記互作系統(tǒng)來證明S1P與UDPG直接相互作用，可見Direct Binding是趨勢,。

Octet®分子互作分析系統(tǒng)的優(yōu)勢在于

Octet® 讓分子互作不再復雜,！祝愿大家可以用賽多利斯神器發(fā)好文章！