什么是電子顯微鏡,?
電子顯微鏡是通過用電子束照射樣品來觀察樣品的顯微鏡。由于電子束的波長極短,,因此可以觀察到光學顯微鏡無法觀察到的超精細結(jié)構(gòu),。主要有兩種類型:將電子束的透射率輸出為圖像的類型,以及將電子束與樣品之間相互作用產(chǎn)生的信號成像的類型,。
許多作為產(chǎn)品出售的電子顯微鏡都針對工業(yè)材料進行了優(yōu)化,,并且針對觀察生物樣品進行了優(yōu)化。此外,,電子顯微鏡??s寫為“電子顯微鏡”或EM,這是其英文名稱的第一個字母,。
電子顯微鏡的應用
在工業(yè)領域,,它用于通過分析斷裂表面來調(diào)查金屬零件損壞的原因,并通過觀察加工表面來檢查質(zhì)量,。此外,,通過觀察聚合物網(wǎng)絡,,我們可以研究機械性能并評估雜質(zhì)的存在,。在生命科學領域,我們通過可視化細胞內(nèi)細胞器的精細結(jié)構(gòu)并觀察神經(jīng)元復雜的纏繞來繪制神經(jīng)元之間的連接。此外,,該方法還被發(fā)現(xiàn)通過對樣品進行簡單的預處理即可應用于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析,,并因此獲得了2017年諾貝爾化學獎。
電子顯微鏡原理
構(gòu)成電子顯微鏡的元件是輻射源,、透鏡和探測器,,從文字上看,它的結(jié)構(gòu)與光學顯微鏡非常相似,。然而,,它們的原理都與光學顯微鏡顯著不同。
首先,,電子束與空氣中的分子碰撞,,立即衰減消失。因此,,電子束的產(chǎn)生和照射必須在真空中進行,。
其次,一般光學系統(tǒng)中使用的玻璃透鏡傳輸電子束,,因此為了折射電子束,,需要使用施加磁場來聚焦電子束的磁透鏡。
此類鏡頭的一個特點是光學像差較大,,為了改善這一點,,它們被設計成較小的數(shù)值孔徑。這使得電子顯微鏡能夠具有較深的焦深,,從而可以進行深度的三維觀察,。
標準電子顯微鏡分為兩類:
1.透射電子顯微鏡 (TEM)
這是一種使電子束穿過樣品并根據(jù)其衰減獲得對比度的方法。為了使電子束能夠通過,,必須將樣品厚度調(diào)整極薄,。噴射電子的強度稱為加速電壓,在300 kV的加速電壓下,,波長極短為0.00197 nm,,分辨率為0.1 nm,與光源尺寸數(shù)量級,。換算到最高放大倍數(shù)時,,這是80萬倍,是光學顯微鏡的800倍,,可見高分辨率,。透射電子顯微鏡觀察穿過樣品的電子,,非常適合在極小的區(qū)域觀察樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu),例如晶體結(jié)構(gòu),。
2.掃描電子顯微鏡(SEM)
當在真空中用電子束照射材料時,,會發(fā)射二次電子、反射電子,、特征X射線等,。掃描電子顯微鏡圖像是通過掃描空間聚焦電子束并根據(jù)二次電子和背散射電子信號形成圖像來創(chuàng)建的。由于二次電子是在樣品表面附近產(chǎn)生的,,因此二次電子圖像適合觀察樣品上的微小不規(guī)則性,。背散射電子是與構(gòu)成樣品的原子碰撞并被反彈回來的電子,背散射電子的數(shù)量取決于樣品的組成(原子序數(shù),、晶體取向等),。因此,背散射電子圖像適合評估樣品表面的成分分布,。
當電子束擊中樣品時,,構(gòu)成其表面的原子被激發(fā)并發(fā)射電子。另外,,還會發(fā)射反射電子和特征X射線,,但它們被稱為二次電子,可以通過點掃描所發(fā)射的二次電子的強度來獲得,。
只能用電子顯微鏡才能觀察到的東西
與一般光學顯微鏡相比,,電子顯微鏡具有高分辨率,使得可以以原子尺寸觀察細胞和金屬晶體等微小組織結(jié)構(gòu),。
以細胞為例,,用光學顯微鏡無法詳細觀察細胞內(nèi)除細胞核以外的微小結(jié)構(gòu),但用電子顯微鏡卻可以,。這使得詳細研究各種功能成為可能,,例如細胞內(nèi)酶的功能和細胞結(jié)構(gòu)的反應。
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