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實時熒光定量技術(shù)服務(wù)
— 華夏遠洋明星產(chǎn)品
*部分、背景知識
實時熒光定量PCR（Real-time PCR）即通過熒光染料或熒光標記的特異性探針對PCR反應過程進行實時監(jiān)測,，根據(jù)PCR指數(shù)擴增期間熒光信號的變化來即時測定對應特異產(chǎn)物的含量,，并據(jù)此推斷目的基因的初始量。該方法可以檢測細胞,、組織或微生物中基因表達變化,，比較不同組織的mRNA表達差異。如不同藥物濃度處理后相關(guān)基因表達水平高低變化,；驗證基因芯片結(jié)果,；siRNA干擾的實驗結(jié)果等。與常規(guī)PCR（RT-PCR）相比,，實時熒光定量PCR具有*的靈敏度,、高度的重復性和的特異性。因為PCR擴增過程閉蓋操作,，避免了反應產(chǎn)物的污染,，大大提高了結(jié)果的可靠性，現(xiàn)已成為現(xiàn)階段*的核酸分子定量檢測的金標準,，在基因表達研究和臨床疾病檢測等領(lǐng)域已得到廣泛應用,。
第二部分、為何稱之為明星產(chǎn)品,？
服務(wù)：
一,、 實驗設(shè)備：所用熒光定量PCR儀為伯樂（BIO-RAD）公司儀器；
二,、 試劑耗材配備：所用試劑為SYBR Green I 的升級替代產(chǎn)品Eva Green,，*白色低腰八聯(lián)排管；
三,、 論文發(fā)表標準：論文可發(fā)表在國外任何影響因子的刊物上,；
四、 參觀學習：實驗中，客戶可以隨時來參觀學習詢問,；
五,、 實驗要求：根據(jù)客戶要求每個反應免費重復2-3次。樣本在60個以上,，基因3個或以上（含內(nèi)參）,，RNA提取和反轉(zhuǎn)錄項目免費。
第三部分,、技術(shù)流程
1,、RNA的提取,；
2,、DNase I 消化RNA中殘留的DNA；
3,、瓊脂糖凝膠電泳,，判斷RNA的質(zhì)量；
4,、RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA,；
5、引物設(shè)計,、合成,、驗證，反應體系和反應條件優(yōu)化,；
6,、上機檢測：包括擴增曲線、溶解曲線,；
7,、數(shù)據(jù)整理、表達量計算,、作圖,；
8、實驗報告的書寫,，包括詳細的儀器,、耗材、試劑,、引物信息,、反應體系、實驗條件,、實驗圖片,、實驗數(shù)據(jù)及結(jié)果分析,。
第四部分、送樣要求
細胞（≥106）,、組織（≥100mg）、血液（≥1ml）,、葉片（≥100mg）等樣品材料,，基因組DNA或總RNA（體積≥20μl，濃度≥50 ng/μl）,。外地客戶可以干冰郵寄,，北京客戶直接公司專員取樣。
第五部分,、背景資料
客戶提供物種信息,、GeneBank號、目的基因名稱或特異基因的序列,。
第六部分,、提供結(jié)果
實驗所用所有儀器試劑及耗材、引物序列,；RNA電泳圖和PCR特異性電泳圖,；詳細的實驗過程；原始數(shù)據(jù)（包括擴增曲線和熔解曲線）及數(shù)據(jù)分析結(jié)果,。
第七部分,、服務(wù)內(nèi)容、報價,、周期
| 服務(wù)編號 | 服務(wù)項目 | 實驗說明 | 價格 | 周期 |
| HX-R1 | RNA提取 | 包括RNA提取,、DNase I消化殘留的DNA、RNA電泳 | 100元/樣品 （樣品大于30個半價） | 2-6個工作日 |
| HX-R2 | 反轉(zhuǎn)錄 | 反轉(zhuǎn)錄,、內(nèi)參基因測試 | 80元/樣品 （樣品大于30個半價） | 2-6個工作日 |
| HX-T1 | 探針合成 | 探針設(shè)計,、合成、驗證 | 2000元/基因 | 5-10個工作日 |
| HX-S1 | 相對定量-染料法 | 引物設(shè)計,、合成,、驗證、上機檢測,、3次實驗重復,，數(shù)據(jù)分析。 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-S2 | 相對定量-TaqMan探針法 | 引物設(shè)計,、合成,、驗證、上機檢測,、3次實驗重復,，數(shù)據(jù)分析 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-S3 | 定量染料法 | 引物設(shè)計,、合成、驗證,、上機檢測,、3次實驗重復，數(shù)據(jù)分析 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-S4 | 定量TaqMan探針法 | 引物設(shè)計,、合成,、驗證、上機檢測,、3次實驗重復,，數(shù)據(jù)分析 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-05 | 構(gòu)建標準品 | PCR擴增、純化,、OD值檢測,、濃度計算 | 600元/基因 | 2-6個工作日 |
| HX-06 | 標準曲線 | 制作標準曲線 | 800元/基因 | 2-6個工作日 |
【收款方式：本公司所有科研服務(wù)均收取60%預付款，實驗完成后,，1個月內(nèi)結(jié)清尾款,。具體優(yōu)惠方式和細節(jié)歡迎您來信或。】
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北京華夏遠洋科技有限公司
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