色譜柱的使用與維護(hù)

1、色譜柱的使用說(shuō)明：
（1）色譜柱使用前注意事項(xiàng)：色譜柱的儲(chǔ)存液無(wú)特殊說(shuō)明,，均為評(píng)價(jià)報(bào)告所示的流動(dòng)相,。在使用前，一定要注意色譜柱的儲(chǔ)存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶,。在反相色譜中,，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應(yīng)先用10％左右的低濃度的有機(jī)相洗脫劑過(guò)渡一下,，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機(jī)相中很容易析出,，堵塞色譜柱。
    （2）流動(dòng)相：流動(dòng)相中所使用的各種有機(jī)溶劑要盡可能使用色譜純,，配流動(dòng)相的水是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水,。如果將所配得流動(dòng)相再經(jīng)過(guò)0.45μm的濾膜過(guò)濾一次則更好，尤其是含鹽的流動(dòng)相,。另外,，裝流動(dòng)相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線(xiàn)過(guò)濾器等裝置應(yīng)該定期清洗或更換。
    以常規(guī)硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的PH值適用范圍是2.0-8.0,，BDS C18適合于堿性化合物,，PH值適用范圍為2.0-10.0,。當(dāng)必須要在PH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時(shí)，每次使用結(jié)束后立即用適合于色譜柱儲(chǔ)存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑清洗,，并*置換掉原來(lái)所使用的流動(dòng)相,。

（3）樣品：樣品也要盡可能清潔,，可選用樣品過(guò)濾器或樣品預(yù)處理柱（SPE）對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理,；若樣品不便處理,，要使用保護(hù)柱,。在用正相色譜法分析樣品時(shí),，所有的溶劑和樣品應(yīng)嚴(yán)格脫水,。
2,、色譜柱的保存
（1）反相色譜柱每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng)：使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相,，實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,，洗掉色譜柱中的鹽,，再用甲醇沖洗30分鐘。注意：不能用純水沖洗柱子,，應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,，防止將填料沖塌陷。
    （2）長(zhǎng)期保存色譜柱：如色譜柱要長(zhǎng)時(shí)間保存,，必須存于合適的溶劑下,。對(duì)于反相柱可以?xún)?chǔ)存于純甲醇或乙腈中，正相柱可以?xún)?chǔ)存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,，離子交換柱可以?xún)?chǔ)存于水（含防腐劑*或柳硫汞）中,，并將購(gòu)買(mǎi)新色譜柱時(shí)附送的堵頭堵上。儲(chǔ)存的溫度是室溫,。
3,、色譜柱的再生
    因?yàn)樯V柱是消耗品，隨著使用時(shí)間或進(jìn)樣次數(shù)的增加,，會(huì)出現(xiàn)色譜峰高降低,，峰寬加大或出現(xiàn)肩峰的現(xiàn)象，一般來(lái)說(shuō)可能是柱效下降,。
（1）反相柱的再生：依次采用20-30倍的色譜柱體積的甲醇：水=10：90 （V/V）,，乙腈，異丙醇作為流動(dòng)相沖洗色譜柱,，完成后再以相反順序沖洗色譜柱,。
（2）正相柱的再生：依次以20-30倍色譜柱的體積的正己烷,、異丙醇,、二氯甲烷、甲醇作為流動(dòng)相沖洗色譜柱,，然后再以相反的順序沖洗色譜柱,。要注意上述溶劑必須嚴(yán)格脫水,。
4、色譜柱在使用過(guò)程中易出現(xiàn)的問(wèn)題和解決辦法
    色譜柱在使用中zui常見(jiàn)的問(wèn)題就是柱壓升高,，如果柱壓是在長(zhǎng)時(shí)間使用過(guò)程中緩慢增加,，屬于正常現(xiàn)象,。但柱壓在使用過(guò)程中突然升高（系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外）,，以下列舉了部分常見(jiàn)原因及解決辦法：
    （1）色譜柱頭的過(guò)濾篩板堵塞或污染；
    解決方法：如確定是色譜柱頭的過(guò)濾篩板被污染,，可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,，或者卸下色譜柱頭，將其放在10％的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘,，后再用純水超聲10分鐘,，重新裝入色譜柱。
    （2）色譜柱頭的填料被樣品污染,；
    解決方法：如確定色譜柱頭的填料被污染,，將柱頭螺絲卸下，挖出柱內(nèi)前段被污染的填料,，用相同的柱填料重新填入,，仔細(xì)修復(fù)后，重新安裝上柱頭螺絲,。
    （3）色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機(jī)溶劑,，形成結(jié)晶析出； 解決方法：如確定定是鹽結(jié)晶,，用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解,，再換高濃度甲醇。
    （4）流動(dòng)相PH值過(guò)大或過(guò)小使固定相結(jié)構(gòu)破壞或溶解,。解決方法：如果因PH值使用不當(dāng),，很難恢復(fù) 。