皖儀離子色譜法測定多肽中的哌啶

關鍵詞：離子色譜,；多肽；合成,；哌啶,；方法學,。

引言

哌啶是一種含有兩個碳和一個氮的環(huán)狀有機化合物。在多肽合成中,，哌啶主要是作為一個結構單元或一個反應的底物存在,。哌啶在多肽合成中起到了多種作用，從結構單元到保護基團,，再到反應底物和優(yōu)化反應條件,。哌啶在最終合成的多肽中有所殘留，而哌啶具有毒性,，是一種升壓劑,，因此必須控制最終產物的哌啶殘留量。皖儀開發(fā)了一種離子色譜測試方法檢測多肽中哌啶的含量,，樣品前處理操作簡單,，測試準確性高，重復性良好,，與其他組分間分離度良好,，可以滿足客戶大規(guī)模測試的要求，并且提高時效性,，測試結果一致性,，減少人為及系統(tǒng)誤差。

1,、實驗方法

1.1 測試條件儀器：

IC6600系列離子色譜儀配置電導檢測器

圖為IC6600系列多功能離子色譜儀

色譜柱：MS-5C-P1陽離子色譜柱（4.6mm×250mm）,；
保護柱：陽離子保護柱（30 mm×4 mm）；

柱溫：30℃,；

流速：1.0ml/min,；

進樣量：25μL；

檢測器：電導檢測器,。

1.2 使用試劑標樣：哌啶標準樣品（客戶提供的純哌啶）

1.3 標準溶液制備標準原液的制備：稱量0.100g純哌啶移至100mL容量瓶用純水定容至刻度線,。

標準樣品工作液:分別吸取0.002mL、0.005mL,、0.01mL,、0.02mL、0.05mL,、0.08mL和0.10mL母液(1000mg/L)于10mL容量瓶中,用超純水定容至刻度,配得哌啶質量濃度為0.2mg/L,、0.5mg/L、1mg/L,、2mg/L,、5mg/L、8mg/L和10mg/L的混合標準工作液,。臨用現(xiàn)配,。

表1標準系列曲線濃度梯度表

2,、測試結果

2.1 哌啶線性測試結果

依次移取0.2mg/L、0.5mg/L,、1mg/L,、2mg/L、5mg/L,、8mg/L和10mg/L的系列標準工作曲線工作液,，按照1.1工作測試條件得到標準曲線多點重疊圖如圖1，哌啶在該色譜條件下線性相關系數(shù)R=0.999以上,，線性良好,。

圖1 哌啶標準曲線重疊色譜圖

表2線性方程

2.2 樣品譜圖

在1.1的工作測試條件下條件下，對樣品進行檢測,。樣品圖譜如圖2所示樣品圖譜中的目標哌啶離子峰形對稱,，分離度良好，最終得到樣品中哌啶的含量,。樣品中哌啶含量為2.283mg/L,，樣品重復性良好樣品RSD在0.301％，符合客戶需求,。

圖2 樣品測試譜圖

3,、總結

本次采用皖儀科技離子色譜儀IC6600系列對樣品中的哌啶進行標準曲線驗證、重復性驗證,。測試結果峰形較好,，線性良好，重復性滿足要求,，靈敏度高完全滿足測試要求,。