國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì) 國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》（GB 2760-2024）等47項(xiàng)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和6項(xiàng)修改單的公告（2024年 第1號(hào)）其中包括GB 5009.299-2024《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中乳鐵蛋白的測(cè)定》,，該標(biāo)準(zhǔn)于2024年8月8日正式實(shí)施,。

乳鐵蛋白

乳鐵蛋白是一種鐵結(jié)合蛋白，屬于轉(zhuǎn)鐵蛋白家族中的一員,。它是一種具有多種生理活性的天然蛋白質(zhì),、參與調(diào)節(jié)免疫功能、抗微生物,、調(diào)節(jié)鐵吸收,、促進(jìn)腸道細(xì)胞增值分化等功能。乳鐵蛋白主要存在于母乳,，也可以從乳制品,、肉,、蛋及強(qiáng)化乳鐵蛋白食品中攝取,。

萊奧為即將實(shí)施的標(biāo)準(zhǔn)《GB 5009.299-2024》，提供最佳的前處理解決方案,。

Leowlab Purifier A48

48位正壓固相萃取儀

儀器設(shè)備：

前處理流程圖：

實(shí)驗(yàn)方法概要：

1,、稱取液態(tài)樣品5g/固體試樣1~5g與燒杯中，加入溫?zé)幔ú坏贸^(guò)50℃,，乳鐵蛋白溫度過(guò)高容易失去活性,，導(dǎo)致變性）磷酸鹽緩沖液Ⅱ，溶解,，液體樣品轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶并定容（固體樣品轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶并定容）,，轉(zhuǎn)入離心管低溫條件下離心（固體樣品取40mL離心），取樣液待凈化,；

2,、活化柱子，準(zhǔn)確移取10mL樣液到Leowlab Purifier A48正壓固相萃取儀,，通過(guò)調(diào)節(jié)低壓閥,，控制流速在1mL/min~3mL/min,，待樣液滴完，用磷酸鹽緩沖液Ⅱ淋洗,，下接10ml玻璃管/15ml離心管,，用5mL磷酸鹽緩沖液Ⅰ洗脫，再用磷酸鹽緩沖液定容至5mL,，過(guò)水膜,，待上機(jī)。

磷酸鹽緩沖液Ⅰ：稱取 7.1g磷酸氫二鈉,、58.4 g氯化鈉,加 900 ml 水溶解,用磷酸調(diào) pH 至 8.0士 0.2,加水定容至 1000 m,臨用現(xiàn)配,。

磷酸鹽緩沖液Ⅱ：稱取 28.4 g磷酸氫二鈉,加 900 mL水溶解,用磷酸調(diào) pH 至 7.5±0.2,加水定容至 1 000 m,臨用現(xiàn)配。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

1,、磷酸鹽緩沖液需要現(xiàn)配現(xiàn)用,。

2、提取時(shí)的緩沖液盡量使用溫?zé)?，溫度不易過(guò)高,，否則導(dǎo)致乳鐵蛋白失活。

3,、過(guò)柱時(shí),，采用Leowlab Purifier A48正壓固相萃取儀過(guò)柱時(shí)，盡量低壓慢慢調(diào)高,，速度控制在1mL/min~3mL/min,，不宜過(guò)快，否則會(huì)導(dǎo)致目標(biāo)物流失,，回收率偏低,；

方案特點(diǎn)：

1、固相萃取時(shí),，相比負(fù)壓,， Leowlab Purifier A48正壓固相萃取儀不需要一個(gè)個(gè)調(diào)節(jié)流速按鈕，省去繁瑣的調(diào)節(jié)時(shí)間,，以及更好保證均勻性,，從而獲得很好的回收率。

2,、負(fù)壓萃取,，因手動(dòng)調(diào)節(jié)流速按鈕，導(dǎo)致流速有一定的快慢偏差,，流速過(guò)快,，柱保留低，回收率低,；流速過(guò)慢,，影響處理時(shí)間,，降低效率。Leowlab Purifier A48正壓固相萃取儀能很好的把控流速快慢,。

3,、若樣品量大，選擇48位正壓固相萃取,，能大大節(jié)省過(guò)柱的時(shí)間,。