小鼠白介素1（IL-1）ELISA Kit使用說明書
在ELISA實驗前的注意事項
1       仔細(xì)閱讀說明書
2       確定試劑盒在有效期內(nèi)
3       按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量,、體積）
4       標(biāo)本制備要規(guī)范,，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份,。短期內(nèi)無法實驗者,，注意低溫保存
5       準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品，如試管,、吸頭,、移液器、離心機等
6       根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7       按說明書將所用試劑平衡至室溫,，配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南
8       選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進(jìn)行配對,；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體,；從同一家公司選擇抗體對,。
9       ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實驗中進(jìn)行彼此相抗的滴定,。同時，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作,。
10     標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書，注意每批的細(xì)節(jié),。在使用細(xì)胞因子前,，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子,。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
11     一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml,?？衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒,、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
12     為了優(yōu)化靈敏度,，建議過夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。
13     若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性,。
14     當(dāng)測定混合液體中的抗原時，如血清,，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.
     每個試劑盒操作是不同的,，請按說明書操作。具體事項請