液相方法優(yōu)化中的色譜柱的優(yōu)化就是色譜柱的選型,。選型的原則無非就是根據(jù)分析物的性質(zhì),、流動(dòng)相的條件,、初步分離的結(jié)果等來選擇合適的色譜柱,。

   強(qiáng)極性樣品對(duì)于強(qiáng)極性的樣品,，C18色譜柱保留弱,，可以選擇碳含量更高的C18；或者選用親水的AQ C18,，用純水相洗脫,，會(huì)增強(qiáng)保留；再或者選用HILIC模式色譜柱,。

弱極性樣品

對(duì)于弱極性的樣品,，C18色譜柱保留很強(qiáng)或常規(guī)有機(jī)相洗脫不下來，可以嘗試碳含量更低的色譜柱,，或者苯己基,，C8，C4等,。

易污染樣品

對(duì)于中藥類或生物類樣品,，色譜柱容易被污染，可以嘗試大孔徑填料色譜柱更耐污染,；

 在分離度要求不高的前提下,，也可以用粒徑更大的色譜柱,，柱壓較低，隨著污染柱壓升高的空間比較大,；

對(duì)于分離要求高,，且容易柱壓高的分離項(xiàng)目，可以嘗試粒徑更大的實(shí)心核填料的色譜柱,，柱效與小粒徑填料的色譜柱相當(dāng),，柱壓更低。

對(duì)于易污染色譜柱的樣品,，可以的話盡量多做一些樣品前處理工作,。

大分子樣品

對(duì)于大分子的分析物，尤其是空間結(jié)構(gòu)大,，比如多肽,、蛋白、核酸,，聚合物等,，選用大孔徑填料的色譜柱。

樣品pKa

我們通常根據(jù)分析物的pKa來選擇流動(dòng)相的pH,，如果分析物pKa小于7,，那么流動(dòng)相pH應(yīng)選擇低于pKa-2，如果pKa大于7,，那么流動(dòng)相pH應(yīng)選擇高于pKa+2,，但常規(guī)的硅膠基質(zhì)色譜柱耐受pH范圍為2-6，我們就根據(jù)流動(dòng)相的pH來選擇可耐受相應(yīng)pH的色譜柱,。

高柱溫

如果柱溫要求超過50℃,，需要選擇耐高溫的色譜柱。

分離度差

對(duì)于分離度差的結(jié)果,，我們可以嘗試增加柱長(zhǎng),，來提高分離度。

塔板數(shù)低對(duì)于塔板數(shù)低的結(jié)果,，我們嘗試減小色譜柱內(nèi)徑或填料粒徑,，來提高柱效。

塔板數(shù)低

對(duì)于塔板數(shù)低的結(jié)果,，我們嘗試減小色譜柱內(nèi)徑或填料粒徑,，來提高柱效。