臺盼藍染色原理

臺盼藍（Trypan blue）是一種細胞活性染料,，常用于細胞計數(shù)和細胞活力檢測,。它可以通過細胞膜進入細胞,，并與細胞內的核酸結合，使細胞呈現(xiàn)藍色,。對于喪失活性或細胞膜不完整的細胞，其細胞膜通透性增加,，臺盼藍染料可以進入細胞內,，使細胞染成藍色。通過觀察被染成藍色細胞的數(shù)量,，即可得出對應的細胞濃度,。

細胞計數(shù)的操作流程

1-準備工作

·準備細胞懸液：將待檢測的細胞培養(yǎng)至適當濃度，收集細胞并制備成細胞懸液,。

·準備臺盼藍染料：將0.4臺盼藍染料用PBS緩沖液稀釋至0.2%,。

·準備細胞計數(shù)儀和計數(shù)板：使用全自動細胞計數(shù)儀（JSY-SC-031H）和血細胞計數(shù)板、蓋玻片進行細胞計數(shù),。

·準備移液器和吸頭：使用移液器和吸頭吸取細胞懸液和臺盼藍染料,。

2-加入臺盼藍染料

·取適量的細胞懸液與離心管中。

·加入等量的臺盼藍染料（0.2%）,，再用移液槍輕輕吹打混勻,。

3-上機檢測

·用移液器取10uL細胞混合液，加入血細胞計數(shù)板中,。

·將加樣后的血細胞計數(shù)板放至細胞計數(shù)儀（JSY-SC-031H）的載物臺上,，選擇對應的計數(shù)模式，即可開始細胞計數(shù)分析（濃度計算公式=（四個大方格內細胞數(shù)之和）/4×（稀釋倍數(shù)）×10⁴）,。

4-查看結果數(shù)據(jù)

計數(shù)完成后,，點擊數(shù)據(jù)詳情，查看細胞濃度,、細胞直徑,、細胞聚團率等數(shù)據(jù),。

注意事項

1-臺盼藍染料具有一定毒性，操作時需佩戴手套和口罩,，避免接觸皮膚和吸入氣體,。

2-臺盼藍染料需避光保存，避免陽光直射,。

3-臺盼藍染料適用于大多數(shù)細胞類型,，但無法很好的區(qū)分細胞和雜質，因此不適用于原代細胞,、PBMC等含有大量雜質碎片的細胞類型,。

4-加樣前，可將臺盼藍靜置數(shù)分鐘,，取上層,。

5-加樣時，應盡量避免氣泡的產生,，以免影響細胞計數(shù)的結果,。

臺盼藍染料是一種常用的細胞活性染料，可用于細胞計數(shù)和活力檢測,。在使用臺盼藍染料進行細胞計數(shù)時,，需要注意操作流程和注意事項，以確保結果的準確性,。