現(xiàn)實是這樣的

支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)試驗室中最常見污染之一,，保守估計常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)中有15~35%存在支原體污染[1],。

一被污染深似海，從此快樂是路人,。

情況是這樣的

支原體（Mycoplasma）是一類沒有細(xì)胞壁,、形狀多變、能通過濾器的可獨立生存的最小原核微生物之一,，大小為0.1~0.3μm,，可以在培養(yǎng)基中自己生存，也可以與細(xì)胞共生或胞內(nèi)寄生[2],。支原體的繁殖周期較短（1~9小時）[3]，因此,，一旦污染,，支原體數(shù)量會快速增長，3～5天內(nèi)能在培養(yǎng)基中達(dá)106CFU/mL,。

支原體污染可能來自培養(yǎng)基,、血清、操作人員,、污染的操作環(huán)境,、污染的細(xì)胞和水浴鍋交叉污染等等，但是人源的污染概率大，數(shù)據(jù)表明80.6%的實驗人員為支原體攜帶者[4],。進(jìn)而影響細(xì)胞生長率,、細(xì)胞形態(tài)、基因表達(dá),、細(xì)胞代謝和細(xì)胞活力,。

支原體污染不易被察覺，因此定期檢測和過程樣品監(jiān)測顯得非常重要,，如細(xì)胞庫檢測,、生產(chǎn)用細(xì)胞檢測、培養(yǎng)過程樣品污染監(jiān)測和檢定用細(xì)胞檢測,，防患于未然,，各個關(guān)鍵節(jié)點監(jiān)控

那能怎么辦？

選用合適的方法,，及時定期監(jiān)測,，重要節(jié)點把控，即可,！

目前支原體檢測方法大致分7種,，主要根據(jù)支原體的特征，如培養(yǎng)基中能自由生活,、個頭小,、形狀多變、可附著到細(xì)胞上,、有獨立的遺傳物質(zhì)且A-T含量高,、有呼吸代謝系統(tǒng)、有細(xì)胞組成等等來建立的檢測方法[5],。

客觀的講,，每個方法都有自己的特點和優(yōu)勢，但目前主流檢測方法是培養(yǎng)法,、指示細(xì)胞法,、NAT方法和生化法。幾種方法特點對比如下：

大家對這幾種方法并不陌生,，其中生化法是基于支原體酶進(jìn)行支原體檢測,。活的支原體溶解后釋放大量能力代謝相關(guān)酶,，與底物反應(yīng)促進(jìn)ADP轉(zhuǎn)化為ATP,。通過熒光素酶法間接反應(yīng)樣品中添加底物前后ATP的變化，進(jìn)而判斷有無支原體污染和評估污染程度,。

生化法支原體檢測典型的特征是能檢測活的支原體,，檢測時間短,。因此很多企業(yè)將該方法用于常規(guī)細(xì)胞樣品和培養(yǎng)過程樣品快速檢測，檢測陽性樣品可以借助更準(zhǔn)確的方法進(jìn)行確認(rèn),，如培養(yǎng)法或者NAT方法,。

MycoAlert支原體檢測試劑盒，20分鐘簡單快速出結(jié)果,。

目前行業(yè)內(nèi)經(jīng)典的生化法支原體檢測試劑盒MycoAlertTM來自Lonza,。

MycoAlert™支原體試劑盒搭配Lucetta™2支原體檢測儀，可以對180多種支原體以及細(xì)胞培養(yǎng)物6大支原體污染進(jìn)行快速,、靈敏的污染篩查,。通過對加入底物前（讀值A(chǔ)）和加入底物后（讀值B）發(fā)光變化，計算B/A比值來判斷是否為支原體污染和評估污染程度大小[6],。

產(chǎn)品特點

• 簡單快速：20分鐘拿到檢測結(jié)果

• 應(yīng)用方便：細(xì)胞上清與試劑混合,，兩次讀值，計算比值即可

• 應(yīng)用廣泛：可檢測所有常規(guī)的支原體和無膽甾原體的污染,，適用于多種樣品類型

• 靈敏度佳：能達(dá)到50cfu/mL靈敏度,，可有效避免假陰性結(jié)果

• 多種選擇：不同規(guī)格試劑盒可供選擇

• 整體方案：試劑盒中含有實驗所需試劑，可以搭配Lucetta™2系統(tǒng),，方便使用