牛胰島素樣生長因子-1EILSA試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用 標(biāo)本：組織勻漿

試 劑 組 成
精密度微孔板96孔 （Microtitration Strips） 1塊 2～8℃干燥保存
酶標(biāo)偶合液 （Conjugate ） 1瓶 12.0毫升 2～8℃冷藏保存
標(biāo)準(zhǔn)品 （Standard） 5瓶 各1.0毫升 2～8℃冷藏保存
呈色劑A （Substrate A） 1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存
呈色劑B （Substrate B） 1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存
終止液 （Stopping Solution） 1瓶 6.0毫升 室溫保存
20倍濃縮洗滌液 （Rinsing Buffer x 20） 1瓶 60.0毫升 2～8℃冷藏保存
5倍濃縮樣品稀釋液 （Diluent x 5） 1瓶 15.0ml 2～8℃冷藏保存
英文說明書,，中文說明書 各一份 室溫保存

二,、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測試劑,，效期內(nèi)使用,，試劑應(yīng)視為傳染物,，不同總批號的試劑不能混用,。
使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,，
濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,，請于37℃孵育15分鐘。
濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,，請于37℃孵育15分鐘
若24小時內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時實(shí)驗(yàn),，標(biāo)本-20℃保存,，避免反復(fù)凍融。
在反復(fù)清洗微孔板,，并扣干微孔中的殘余液體,，否則將降低度，造成吸光度偏離的假像,。
加樣完畢后,，應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,，以便使孔中的液體充分混勻。
試劑盒保存于2～8℃,，請勿冷凍,，有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。

三,、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,，室溫放置至少30分鐘。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,，如微量移液器,，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,，充分混勻待用。）

四,、操 作 步 驟
1．取出酶標(biāo)板,，設(shè)空白孔，依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中（空白孔視為0號標(biāo)準(zhǔn)品,，用醫(yī)用蒸餾水替代）
2,、分別標(biāo)記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）,。
3,、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘；
4,、將酶標(biāo)板板取出,，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,，立即甩去液體;
5,、每個孔中加滿應(yīng)用洗滌液后，輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干,。
6、重復(fù)第5個步驟5次,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干,。
7、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液,。
8,、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標(biāo)板取出,，將其中的液體甩去,，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體,。
10,、每個孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后，室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干,。
11、重復(fù)第5個步驟5次,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干,。
12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl,。輕輕振蕩混勻,。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）
13,、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘,。
14、每個微孔中加入50μl的終止液,，輕輕振蕩混勻。
15,、在酶標(biāo)儀上,，450nm處測定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進(jìn)行測定,。
16,、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算樣本含量

五,、結(jié) 果 判 斷
1. 儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值,；
2、檢測值范圍：0－240pg/ml
3,、敏感度：1.0pg/ml