1. 適用鍵合相 反相色譜柱鍵合相包括：C18,、C8、C4,、C1,、Phenyl、PFP,、aQ 等,。

2. 柱體積 色譜柱的柱體積可以通過(guò)以下公式估算： V=0.68 π (d/2)2 L·10-3 V 為色譜柱柱體積（mL），d 為色譜柱內(nèi)徑（mm）,，L 為色譜 柱長(zhǎng)度（mm）,。

3. 色譜柱柱效測(cè)試與保存 反相色譜柱出廠時(shí)都經(jīng)過(guò)柱效測(cè)試，所用化合物為茶堿,、鄰二 甲苯、對(duì)硝基苯胺,、苯甲酸甲酯和二甲苯,，如有不同，以柱效 報(bào)告為準(zhǔn),。 在條件允許情況下,，請(qǐng)對(duì)新色譜柱進(jìn)行柱效測(cè)試。 反相色譜柱出廠的保存溶劑詳見(jiàn)柱盒或 COA 報(bào)告,。

4. 溫度 所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于 60℃,。

5、 樣品制備 最好將樣品溶解在流動(dòng)相或極性相近的溶劑中,。如果使用梯度 洗脫,，則需要將樣品溶解在初始流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。 樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物,，最好使用 0.45 μm 或更小孔徑 的濾膜過(guò)濾,。同時(shí)建議在刪除空格色譜系統(tǒng)中使用在線(xiàn)過(guò)濾器。 樣品溶液如果使用強(qiáng)洗脫溶劑（例如,，流動(dòng)相為水,，樣品溶劑 為甲醇），為達(dá)到較好峰形,，需要降低進(jìn)樣量（以 250×4.6  mm 規(guī)格為例,，小于 10 μL）。

6,、 流動(dòng)相 所有流動(dòng)相,，特別是含有緩沖鹽的流動(dòng)相，最好實(shí)驗(yàn)當(dāng)天配制； 如果使用了早前配制的流動(dòng)相,，請(qǐng)確保流動(dòng)相 pH 值是否變化,， 并確保流動(dòng)相沒(méi)有發(fā)霉長(zhǎng)菌。 流動(dòng)相的 pH 值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類(lèi)型,。此說(shuō)明書(shū) 上所列的所有的色譜柱上都建議使用 pH 范圍為 2~8 之間的流 動(dòng)相,，如果需要使用 pH 更高（1.5-10）的流動(dòng)相的硅膠柱， 請(qǐng)選用 Acclaim PolarAdvantage II (PA2),、Acclaim AMG C18,、 Accucore Polar Premium 等色譜柱，具體使用情況請(qǐng)咨詢(xún)工程 師或者參考該柱子的說(shuō)明書(shū),。 如實(shí)驗(yàn)方法中使用高比例的水（>95%）作為流動(dòng)相條件,，強(qiáng)烈 建議使用耐水鍵合相，例如 Accucore aQ,、Hypersil GOLD aQ,、 Aquasil C18、Syncronis aQ 等色譜柱,，保證重現(xiàn)性,。 所有流動(dòng)相都需使用 0.22 μm 濾膜過(guò)濾。