步驟:
1.切片準(zhǔn)備:將組織進(jìn)行石蠟包埋,切成薄片并貼附于載玻片上,。-用到的產(chǎn)品:載玻片等,。
2.烤片:將切片放入烤箱中適當(dāng)溫度烤片,,使切片緊密貼附,。
3.脫蠟:依次使用二甲苯等進(jìn)行脫蠟處理,。
- 用到的產(chǎn)品:二甲苯、乙醇等,。
4.水化:梯度乙醇水化至水,。
5.抗原修復(fù):根據(jù)需要選擇合適的抗原修復(fù)方法,如熱修復(fù)或酶修復(fù)等,。
- 用到的產(chǎn)品:抗原修復(fù)液等,。
6. 滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶:使用過(guò)氧化氫溶液處理,。
- 用到的產(chǎn)品:3%過(guò)氧化氫溶液。
7. 封閉:用血清或 BSA 等封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn),。
- 用到的產(chǎn)品:封閉液,。
8. 一抗孵育:滴加特異性一抗,濕盒中孵育,。
- 用到的產(chǎn)品:一抗,。
9. 洗片:用 PBS 多次沖洗。
10. 二抗孵育:加入相應(yīng)二抗孵育,。
- 用到的產(chǎn)品:二抗,。
11. 洗片:再次 PBS 洗。
12. 顯色:使用合適的顯色劑顯色,,如 DAB 等,。
- 用到的產(chǎn)品:DAB 顯色試劑盒等。
13. 復(fù)染:如用蘇木精復(fù)染細(xì)胞核,。
- 用到的產(chǎn)品:蘇木精染液等,。
14. 脫水透明:梯度乙醇脫水,二甲苯透明,。
15. 封片:中性樹膠封片,。
需要注意的是,具體步驟和產(chǎn)品可能因?qū)嶒?yàn)條件和抗體要求等有所不同,,在實(shí)際操作中需根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化,。
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