操作條件對(duì)于色譜分離有很大影響,。
     １,、柱長(zhǎng)，柱內(nèi)徑：一般講,，柱管增長(zhǎng),，可改善分離能力，短則組分餾出的快些；柱內(nèi)徑小分離效果好,，柱內(nèi)徑大處理量大,，但柱內(nèi)徑過(guò)大，將導(dǎo)致?lián)w不能均勻地分布在色譜柱中,。分析用柱管一般內(nèi)徑為３－６毫米,，柱長(zhǎng)為１－４米。
     ２,、柱溫：是一個(gè)重要的操作變數(shù),，直接影響分離效能和分析速度。選擇柱溫的根據(jù)是混合物的沸點(diǎn)范圍,，固定液的配比和鑒定器的靈敏度,。提高柱溫可縮短分析時(shí)間；降低柱溫可使色譜柱選擇性增大,，有利于組分的分離和色譜柱穩(wěn)定性提高,，柱壽命延長(zhǎng)。一般采用等于或高于數(shù)十度于樣品的平均沸點(diǎn)的柱溫為較合適,，對(duì)易揮發(fā)樣用低柱溫,，不易揮發(fā)的樣品采用高柱溫。
     ３,、載氣流速：載氣流速是決定色譜分離的重要原因之一,。一般講流速高色譜峰狹，反之則寬些,，但流速過(guò)高或過(guò)低對(duì)分離都有不利的影響,。流速要求要平穩(wěn)，常用的流速范圍每分鐘在１０－１００亳升之間,。
     ４,、固定相：固定相是由固體吸附劑或涂有固定液的擔(dān)體構(gòu)成,。
     （１）固體吸附劑或擔(dān)體粗細(xì)：一般采用４０－６０目,、６０－８０目、８０－１００目,。當(dāng)用同等長(zhǎng)度的柱子,，顆粒細(xì)的分離效率就要比粗的好些。
     （２）固定液含量：固定液含量對(duì)分離效率的影響很大,，它與擔(dān)體的重量比一般用１５％－２５％,。比例過(guò)大有損于分離，比例過(guò)小會(huì)使色譜峰拖尾,。
     ５,、進(jìn)樣：一般講進(jìn)樣快，進(jìn)樣量小，進(jìn)樣溫度高其分離效果好,。對(duì)進(jìn)液體樣,，速度要快，汽化溫度要高于樣品中高沸點(diǎn)組分的沸點(diǎn)值,，一次汽化,，保證色譜峰形不致展寬、使柱效高,。當(dāng)進(jìn)樣量在一定限度時(shí),，色譜峰的半峰寬是不變的。若進(jìn)樣量過(guò)多就會(huì)造成色譜柱超載,。一般講柱長(zhǎng)增加四倍,，樣品的許可量增加一倍。對(duì)于常規(guī)分析,，液體進(jìn)樣量為１－２０微升,；氣體進(jìn)樣量為０、１－５毫升,。