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光學(xué)顯微鏡的觀察方式

來(lái)源：蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司 2024年05月31日 13:13

光學(xué)顯微鏡適用于多種檢材，如組織切片,、活細(xì)胞,、電路板等。不同檢材光學(xué)特性差異大,，需使用不同觀察方式,，主要有明場(chǎng),、相差,、熒光,、偏光、DIC,、暗場(chǎng),、霍夫曼相襯七種方式。

一臺(tái)光學(xué)顯微鏡可能擁有一種或多種觀察方式,，今天我們先來(lái)說(shuō)說(shuō)明場(chǎng)觀察方式,。

（1）成像原理

明場(chǎng)觀察是光學(xué)顯微鏡最基礎(chǔ)的觀察方式，其利用可見(jiàn)光（約400-700nm）作為照明光源,，光線相位,、照射角度等性質(zhì)不作改變，直接照射在樣品上進(jìn)行成像,。

明場(chǎng)觀察有透射照明和反射照明兩種照明方式,，前者是照明光線透過(guò)樣品后進(jìn)入物鏡，主要適合有透明度的薄樣品,；后者是照明光線照射到樣品后反射進(jìn)入物鏡,，主要適合不透明的厚樣品。

（2）關(guān)鍵部件

明場(chǎng)觀察不需要特殊的部件,，其效果主要受光源和聚光鏡影響。光源有兩項(xiàng)核心規(guī)格,，色溫和顯色性,。聚光鏡核心規(guī)格是數(shù)值孔徑。

傳統(tǒng)以鹵素?zé)舻茸鳛楣庠?，其特點(diǎn)是色溫偏暖,，約3000K，亮度越低色溫越暖,。人眼觀察較為舒適,，顯色性高，但一般需要在光源處使用 RBD 日光濾光片或藍(lán)色濾光片校正色溫,，否則對(duì)于樣本中紅染,、黃染等細(xì)節(jié)的分辨很差。主要缺點(diǎn)是發(fā)熱大,、使用不當(dāng)容易燒,，另外用濾色片校正色溫會(huì)損失光強(qiáng)，對(duì)拍照有影響,。

使用技巧：關(guān)鹵素?zé)艄庠辞跋劝压鈴?qiáng)調(diào)低,。以高光強(qiáng)啟動(dòng)鹵素?zé)羧菀讓?dǎo)致燈泡燒壞,，調(diào)低光強(qiáng)再關(guān)，可以避免下次開燈時(shí)意外燒壞燈泡,。LED光源則基本不影響,，但養(yǎng)成好習(xí)慣總是有益的。

目前專業(yè)LED光源已逐步成為主流,，其色溫恒定在5000K左右,，接近日光的平均色溫，顯色性較好,，人眼觀察和數(shù)字相機(jī)成像都有較好效果,。此外LED光源功耗低亮度高，一般3W LED可以達(dá)到30W鹵素?zé)艄鈴?qiáng),，方便即開即用,，壽命長(zhǎng)，免維護(hù),，因此明美大部分顯微鏡均默認(rèn)采用LED作為明場(chǎng)光源,，鹵素?zé)魟t作為可選。

鹵素?zé)粽彰饔覉DLED燈照明

聚光鏡會(huì)有倍數(shù)刻度或者數(shù)值孔徑刻度,，一般調(diào)到物鏡對(duì)應(yīng)的倍數(shù),，或者比物鏡數(shù)值孔徑稍低的數(shù)值即可。更精準(zhǔn)的調(diào)試方式,，拔出目鏡,，邊調(diào)節(jié)孔徑光闌邊從觀察筒觀察物鏡后焦平面，當(dāng)畫面占視野3/4左右時(shí)效果好,，但不建議頻繁這樣操作,，因?yàn)槿菀鬃層^察筒進(jìn)灰。

產(chǎn)品小知識(shí)1：除了數(shù)值孔徑,，聚光鏡還有消色差,、消球差等規(guī)格區(qū)別，在40X以上會(huì)對(duì)成像質(zhì)量有較大影響,，所以并不是數(shù)值孔徑高就等于更好,。

產(chǎn)品小知識(shí)2：如果您想使用超低倍2X物鏡，您需要選配搖出式聚光鏡,。

（3）成像特點(diǎn)

明場(chǎng)觀察能較好地呈現(xiàn)樣品色彩,，但襯度較低，尤其是透射照明的明場(chǎng)中,。在透射照明成像過(guò)程中,，帶有樣品信息的光線與背景光線混合在一起，這使樣品淺色部分與背景對(duì)比度較低,，遇到活細(xì)胞等透明樣品基本看不出細(xì)節(jié),。因此,，該觀察方式適合已經(jīng)染色樣品或本身有顏色的樣品進(jìn)行成像。

特點(diǎn)jpg

（4）主要應(yīng)用

①醫(yī)學(xué)研究：HE,、IHC等染色病理切片檢驗(yàn)

組織切片

明美研究級(jí)生物顯微鏡ML51-N明場(chǎng)觀察樣品圖

左圖：HE 組織病理切片樣品右圖：IHC 免疫組化樣品

②材料分析：金相組織 ,、電路芯片等。

金相顯微鏡

明美金相顯微鏡MJ43

明美體視顯微鏡MZX100拍攝的蜜蜂

（5）明美產(chǎn)品推薦

①生物顯微

推薦產(chǎn)品：ML11/ML31/ML41/ML51

生物顯微鏡

配置白光LED光源,，成像明亮清晰
采用無(wú)限遠(yuǎn)光路系統(tǒng),，可靈活升級(jí)配置
適用于教學(xué)、科研,、醫(yī)學(xué)等場(chǎng)景

②金相顯微鏡

推薦產(chǎn)品：MJ31/MJ33/MJ43/MJ41-LED/MJ42

金相顯微鏡

可配置LED或鹵素?zé)舻裙庠?，滿足不同觀察習(xí)慣
配置長(zhǎng)工作距離金相物鏡，成像清晰,，對(duì)比度高
適用于工業(yè),、材料學(xué)等觀察場(chǎng)景

③體式顯微鏡

推薦產(chǎn)品：MZ62/MZ101

體視顯微鏡

獨(dú)立雙光路系統(tǒng)設(shè)計(jì)，成像具有立體感
可配備透射與反射LED光源,，適配不同檢材
可適用于常規(guī)生物醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),，科研研究和工業(yè)檢測(cè)等高精度觀察領(lǐng)域

④顯微鏡相機(jī)

推薦產(chǎn)品：MSX11/ MSX2 /MSX1/MDX

顯微鏡相機(jī)

大靶面尺寸感光芯片，高像素設(shè)計(jì),，細(xì)節(jié)成像更清晰
靈敏度高,，色彩還原性好
軟件易用，可搭配明美及其他品牌顯微鏡

透射與反射（落射）光路示意圖

明美顯微鏡

生物顯微鏡

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