濃度梯度紙條擴散法藥敏試驗又稱E-試驗,,是將受試菌株接種于瓊脂平板培養(yǎng)基后加貼E-試驗試紙條,,孵育培養(yǎng)后根據(jù)說明書進行判讀,并按照美國臨床和實驗室標準協(xié)會指南進行分析,。此法結(jié)合了擴散法和稀釋法的原理設(shè)計的濃度梯度藥敏試驗,,可進行直接定量檢測??捎糜诟鞣N常見菌,、苛養(yǎng)菌、分枝桿菌,、厭氧菌和真菌等的藥敏試驗,。尤其是酵母菌和霉菌的藥敏試驗是一項新的技術(shù),由于影響因素較多,,直接藥敏試驗較為困難,,E試驗法由于結(jié)果準確、穩(wěn)定,,受到廣泛認同,。
檢測原理:將MTS藥敏紙條應(yīng)用于接種的瓊脂表面后,預(yù)設(shè)的抗生素梯度會立即轉(zhuǎn)移到瓊脂基質(zhì)中,。培養(yǎng)18小時或更長時間后,,試驗條沿線會形成對稱的抑制橢圓,從橢圓與試驗條交接處的刻度直接讀取MIC值。
測試步驟:
1,、在打開包裝前,,讓封裝達到室溫以減少冷凝。
2,、挑選4至5個形態(tài)相似的獨立菌落,,用培養(yǎng)基拭子涂抹后懸浮在5毫升的適合懸浮液中。
3,、將懸浮液與相應(yīng)的McFarland標準進行比較,,確保懸浮液的渾濁度。
4,、將試驗條按照MIC刻度朝上的方式放置在瓊脂表面,,并用無菌鑷子壓實。
結(jié)果評估:
培養(yǎng)結(jié)束后,,在抑制橢圓邊緣與試驗條交接的地方讀取MIC值,。可以根據(jù)CLSI或EUCAST的標準來解讀MIC值,,并對結(jié)果進行分類,。
存儲與處理:
未開封的MTS藥敏紙條應(yīng)存放在-20°C~+8℃,部分藥敏紙條需要存放在-20℃,;開封后的試驗條應(yīng)在2-8°C的密封管中存放不超過7天,。
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