脂質(zhì)配方的性質(zhì)取決于具體成分(陽離子,、陰離子和中性脂質(zhì))。
但是,,同一種制備方法適用于所有成分的脂質(zhì)囊泡,。制備流程的一般要素包括制備用于水合的脂質(zhì)、攪拌水合以及減小粒徑,,從而獲得均勻分布的囊泡,。
今天介紹制備用于水合的脂質(zhì):
當用混合脂質(zhì)成分制備脂質(zhì)體時,,必須先溶解脂質(zhì)并混合于有機溶劑中,以確保獲得均勻的脂質(zhì)混合物,。
通常,,該過程使用氯仿或氯仿:甲醇混合液完成。
目的在于使脂質(zhì)混合,,獲得澄清的脂質(zhì)溶液,。
一般情況下,脂質(zhì)溶液的制備濃度為10-20mg脂質(zhì)/ml有機溶劑,,但是,,在脂質(zhì)溶解度和混合程度可接受的情況下,也可使用更高濃度,。
一旦脂質(zhì)充分混合于有機溶劑中,,則除去溶劑以產(chǎn)生脂質(zhì)薄膜。如有機溶劑較少(< 1mL),,可在通風櫥內(nèi)使用干燥氮氣流或氬氣流蒸發(fā)溶劑,。
如有機溶劑較多,應通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機溶劑,,從而在圓底燒瓶內(nèi)壁形成脂質(zhì)薄膜,。
將樣品瓶或燒瓶放在真空泵上過夜,去除殘留有機溶劑,,使脂質(zhì)薄膜干燥,。如果對使用氯仿有異議,也可以選擇使用叔丁醇或環(huán)己烷溶解脂質(zhì),。
將脂質(zhì)溶液轉(zhuǎn)移到容器中,,并將容器放在干冰塊上或在干冰-丙酮或酒精(乙醇或甲醇)浴中旋轉(zhuǎn),使其凍結(jié),。
使用酒精浴時,,應確認容器能夠承受突然的溫度變化而不發(fā)生破裂。
隨后,,將凍結(jié)的脂質(zhì)結(jié)塊放到真空泵上凍干,,直至干燥(1-3天,具體取決于溶劑體積),。
脂質(zhì)結(jié)塊的厚度不應超過凍干容器的直徑,。
干燥的脂質(zhì)薄膜或結(jié)塊可從真空泵上取下,將容器牢固密封并冷凍儲存,,直至用于水合,。
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