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ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,，又保留酶的活性,。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上,。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,，使測定方法達到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原,，也可用于測定抗體,。
操作技巧說明：
1.在吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸,，減少誤差,。
2.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
3.為防止樣品蒸發(fā),，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4.合理安排檢測量,，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長,。
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