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常見細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1.細(xì)菌污染
細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染,,即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素,也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴?。常見的有革蘭氏陽性菌,,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,,其中又以白色葡萄球菌較常見,。
培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后,會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,,pH改變,。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變,胞內(nèi)顆粒增多,、增粗,,圓脫落死亡。
2.真菌污染
真菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)過程中常見的一種,,常見的真菌有煙曲霉,、黑曲菌,、孔子霉、毛霉菌,、白色念珠菌和酵母菌,。
培養(yǎng)細(xì)胞受真菌污染后,,可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點(diǎn),,有的散在生長(zhǎng),培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁,;倒置顯微鏡下可見絲狀,、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯(cuò)在細(xì)胞之間或培養(yǎng)基中,有的呈鏈狀排列,。
真菌污染后,,細(xì)胞生長(zhǎng)變慢,但后由于營(yíng)養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡,。
3.支原體污染
支原體是介于細(xì)菌與病毒之間能獨(dú)立生活的微生物,小直徑0.2μm,一般過濾除菌無法去除它,,光鏡下難以看清它的形態(tài)結(jié)構(gòu),。開始不易發(fā)現(xiàn),能在偏堿條件下生存,,對(duì)有抗藥性,。多吸附于細(xì)胞表面或散在于細(xì)胞之間。
培養(yǎng)細(xì)胞受支原體污染后,,部分敏感細(xì)胞可見細(xì)胞生長(zhǎng)增殖變慢,,部分細(xì)胞變圓,從瓶壁脫落,。但多數(shù)細(xì)胞污染后無明顯變化,,或略有變化,若不及時(shí)處理,,還會(huì)產(chǎn)生交叉污染,。
4.病毒污染
組織細(xì)胞培養(yǎng)過程中,如果沒有除去潛在的病毒,,就會(huì)產(chǎn)生病毒污染,。目前,從原代猴腎細(xì)胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒,。
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