細(xì)胞培養(yǎng)基的pH一般在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖體系是一種生理pH緩沖體系(是人體血液中最重要的pH緩沖體系),，大多數(shù)培養(yǎng)基都是用它來(lái)維持穩(wěn)定的pH值，用粉末配制培養(yǎng)液時(shí),，往往需要加入一定量的碳酸氫鈉,。

對(duì)于大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖體系的培養(yǎng)液，為了維持穩(wěn)定的pH,，培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,，以維持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳濃度。同時(shí),，用于細(xì)胞培養(yǎng)的容器需要一定程度的通風(fēng),，以便于氣體的交換。

使用其他pH緩沖系統(tǒng)是否不需要二氧化碳培養(yǎng)箱,？已經(jīng)發(fā)現(xiàn),，由于空氣中二氧化碳濃度低，如果細(xì)胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，培養(yǎng)液中的HCO 3-將被耗盡,，這將影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。因此,，大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)仍然需要二氧化碳培養(yǎng)箱,。

細(xì)胞培養(yǎng)基中常加入其他pH緩沖體系,，如HEPES緩沖體系，以增加pH緩沖容量,。HEPES在pH7.2-7.4有很強(qiáng)的緩沖能力,。當(dāng)可呼吸的培養(yǎng)容器從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出時(shí)，培養(yǎng)液中的碳酸鹽緩沖體系會(huì)因?yàn)榭諝庵卸趸紳舛鹊投プ饔?。此時(shí)HEPES的緩沖體系可以保持pH穩(wěn)定,。