血清和血漿均是不含細胞(包括血小板)等有形成分的血液液體部分,,其主要區(qū)別是血清不含凝血因子和血小板,,血漿則含有凝血因子,,它們的制備方法如下:
1,、血清的制備:獲得的血液不能抗凝,,盛于離心管或可以離心的器皿中,,靜置或置37℃環(huán)境中促其凝固,,待血液凝固后,,將其平衡后離心(一般為3000rpm,,離心 5~10min),得到的上清液即為血清,,可小心將上清吸出(注意切勿吸出細胞成分),,分裝備用。
2,、血漿制備:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝劑(抗凝劑:血液 = 1:9,,將血液加到一定量后顛倒混勻,離心(離心條件同上)后所得的上清液即為血漿,。初用者最好將上清移至另一清潔容器,,吸出血漿時用毛細吸管貼著液面逐漸往下吸,切忌不能吸起細胞成分,。
3,、富含血小板血漿制備:將獲得的血液經800rpm,離心5min,,其上清即為富含血小板血漿,。
血漿與血清區(qū)別
血清
血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出,,放入試管中,,不加抗凝劑,則凝血反應被激活,,血液迅速凝固,,形成膠凍。凝血收縮,,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,,也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,,所以血清中無纖維蛋白原,,這一點是與血漿最大的區(qū)別。而在凝血反應中,,血小板釋放出許多物質,,各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,,如凝血酶原變成凝血酶,,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處,。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同,。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,,都以血清為樣品,。
血漿
相當于結締組織的細胞間質。是血液的重要組成分,,呈淡黃色液體(因含有膽紅素),。血漿的化學成分中,水分占90~92%,,溶質以血漿蛋白為主,。血漿蛋白是多種蛋白質的總稱,用鹽析法可將其分為白蛋白,、球蛋白和纖維蛋白原三類,。血漿蛋白質的功能有:維持血漿膠體滲透壓;組成血液緩沖體系,,參與維持血液酸堿平衡,;運輸營養(yǎng)和代謝物質,血漿蛋白質為親水膠體,,許多難溶于水的物質與其結合變?yōu)橐兹苡谒奈镔|,;營養(yǎng)功能,血漿蛋白分解產生的氨基酸,,可用于合成組織蛋白質或氧化分解供應能量,;參與凝血和免疫作用。血漿的無機鹽主要以離子狀態(tài)存在,,正負離子總量相等,,保持電中性。這些離子在維持血漿晶體滲透壓,、酸堿平衡,、以及神經-肌肉的正常興奮性等方面起著重要作用。血漿的各種化學成分常在一定范圍內不斷地變動,其中以葡萄糖,、蛋白質,、脂肪和激素等的濃度最易受營養(yǎng)狀況和機體活動情況的影響,而無機鹽濃度的變動范圍較小,。血漿的理化特性相對恒定是內環(huán)境穩(wěn)態(tài)的首要表現(xiàn),。
血清與血漿的區(qū)別,主要在于血清不含纖維蛋白原,,纖維蛋白原能轉換成纖維蛋白,具有凝血作用
藥動實驗大部分情況下用血漿,,一般血漿藥物濃度能反映藥物的分布情況,,也比血清量多一些。藥代動力學不僅僅是做血中的藥物濃度,,還要做血漿蛋白結合率,。藥物代謝動力學研究,主要測血漿中的藥物濃度,,但是如果血漿中中含有的抗凝劑影響藥物濃度的測定,,就應使用血清樣品。
血漿的制備:將采取的血漿置含抗凝劑(如:肝素,、草酸鹽,、枸櫞酸鹽、EDTA,、氟化鈉等)試管中,,混合后,2500~3000rpm離心5min,,取上清液即為血漿,。
血清的制備:將采取的血漿在室溫下至少放置30min到1h,待凝結出血餅后,,用細竹棒或玻璃棒輕輕撥去血餅,,然后以2500~3000rpm離心5-10min,取上清液,,即為血清,。
血漿、血清,、全血的優(yōu)缺點:
血漿與血清中的藥物測定值通常是相同的,,而且血成分更能接近于組織液,測定血漿與血清中藥物濃度比全血更能反映機體的具體情況
優(yōu)點 缺點
血漿 處理速度快,,分離速度快,, 獲取量大; 不如血清干凈
血清 干凈,更具有代表性,; 獲取量小,,處理時間長
當藥物與紅細胞結合,而且動力學行為與在血漿中不同,,須采全血進行研究,。
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