Vero細(xì)胞系的建立可以追溯到1962年,起源于非洲綠猴的腎上皮細(xì)胞,。
Vero細(xì)胞克隆及其性質(zhì)
Vero E6細(xì)胞系:
該克隆也稱為Vero C1008,,來自Vero 76細(xì)胞,,1979年由P.J. Price在微量滴定板上使用稀釋技術(shù)分離。 Vero E6細(xì)胞特別適合培養(yǎng)復(fù)制緩慢的病毒,。 Vero 76細(xì)胞:
這些細(xì)胞起源于1968年的一只非洲綠猴的腎臟,,保持了Vero細(xì)胞的上皮形態(tài)特征。
培養(yǎng)猴細(xì)胞系Vero細(xì)胞需要熟悉特定的參數(shù),,如倍增時(shí)間,、接種密度和合適的生長培養(yǎng)基。
人口倍增時(shí)間:
Vero細(xì)胞的倍增時(shí)間約為24小時(shí),。 堅(jiān)持性:
Vero細(xì)胞粘附在表面上,,培養(yǎng)時(shí)通常形成單層,。 播種密度:
建議從1倍10^4 cells/cm^2.的播種密度開始為了培養(yǎng)粘附的Vero細(xì)胞,用PBS清洗它們并用Accutase處理它們以分離它們,。分離后,,離心細(xì)胞,將其重新懸浮在新鮮培養(yǎng)基中,,并將其轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中,。 生長培養(yǎng)基:
哈姆的F12和DMEM都是培養(yǎng)Vero細(xì)胞的合適培養(yǎng)基。這些應(yīng)補(bǔ)充2.5mM L-谷氨酰胺和5%胎牛血清(FBS)以支持最佳生長,。培養(yǎng)基應(yīng)該每周更新兩到三次,。 生長條件:
Vero細(xì)胞在37°C的溫度和5% CO2的潮濕環(huán)境中生長旺盛,。 存儲(chǔ):
對于長期儲(chǔ)存,Vero電池應(yīng)保持在低于-150°C的溫度下,,要么放在超低溫冰箱中,,要么放在液氮的蒸汽相中。 冷凍過程和介質(zhì):
對于冷凍保存,,使用CM-1或CM-ACF或含有FBS和DMSO的生長培養(yǎng)基作為冷凍培養(yǎng)基。采用緩慢冷凍技術(shù),,每分鐘逐漸降低1°C的溫度,。 解凍過程:
將容器浸入37°C水浴中并輕輕攪動(dòng)40-60秒,,解凍Vero細(xì)胞,。然后,在新鮮培養(yǎng)基中稀釋細(xì)胞,,離心去除冷凍保護(hù)劑,,重新懸浮在新鮮生長培養(yǎng)基中,并將其置于新的燒瓶中以恢復(fù)和生長,。 生物安全等級(jí):
Vero細(xì)胞應(yīng)在符合1級(jí)生物安全要求的實(shí)驗(yàn)室中處理。
Vero細(xì)胞系在研究中的應(yīng)用
病毒研究和疫苗生產(chǎn)中的Vero細(xì)胞
Vero細(xì)胞在組織工程和上游生物過程開發(fā)中的作用
Vero細(xì)胞在藥物療效和安全性測試中的應(yīng)用
Vero細(xì)胞的局限性
相關(guān)產(chǎn)品
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